[发明专利]一种采用脐带间充质干细胞延缓骨骼慢性损伤的方法

权利要求书

1.一种采用脐带间充质干细胞延缓骨骼慢性损伤的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一：制备间充质干细胞，制备间充质干细胞抗炎因子；

步骤二：将间充质干细胞抗炎因子与间充质干细胞联合进行局部注射；

将间充质干细胞进行静脉回输；

步骤三：定期随访使用者的各项指标变化。

2.根据权利要求1所述的一种采用脐带间充质干细胞延缓骨骼慢性损伤的方法，其特征在于：在步骤一中，所述间充质干细胞的制备过程为：从液氮中取出制备好的P3代种子细胞，接种至无血清培养基中进行传代培养，培养修箱中培养，标记P4代细胞。

3.根据权利要求2所述的一种采用脐带间充质干细胞延缓骨骼慢性损伤的方法，其特征在于：间充质干细胞融合度为90％以上，收集间充质干细胞，将部分收集好的间充质干细胞使用冻存液，以每只2*10⁷/ml冻存在-80℃冰箱中；将部分间充质干细胞使用盐水，以每支2*10⁷/ml冻存在液氮罐中，然后等待无菌、活率、流式结果。

4.根据权利要求3所述的一种采用脐带间充质干细胞延缓骨骼慢性损伤的方法，其特征在于：

所述间充质干细胞抗炎因子是将间充质干细胞通过物理冷冻破碎的方式提取，将盐水冻存的间充质干细胞取出，在37℃水浴锅中复苏，完全溶解后再次放至液氮中10min，再次取出水浴锅中复苏；再次复苏后的细胞悬液以2000r，10min离心去掉细胞碎片，剩下的为间充质干细胞炎症因子；

所述间充质干细胞的制备方式：取冻存液冻存的间充质干细胞，37℃水浴锅中1min复苏完成，第一次洗涤使用转速为1000r，持续时间为10min，滤网孔径采用70um，滤网过滤掉死细胞，第二次洗涤使用转速为1300r，持续6min。

5.根据权利要求1所述的一种采用脐带间充质干细胞延缓骨骼慢性损伤的方法，其特征在于：

在步骤二中，将间充质干细胞抗炎因子2ml和间充质干细胞2*10⁷作为1份制剂，根据局部损伤的临床情况选择注射份数，同时配合间充质干细胞静脉回输，间充质干细胞制剂为：间充质干细胞5*10⁷个，95ml生理盐水，5ml白蛋白的混合制剂，局部注射1次配合静脉回输1次，共3次为一个疗程，每次间隔1个月。

6.根据权利要求1所述的一种采用脐带间充质干细胞延缓骨骼慢性损伤的方法，其特征在于：局部注射的部位保持干净，避免感染，两周内应注意清淡饮食，避免食用过敏性食物。