[发明专利]抗人CD19与CD206双特异性抗体及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种抗人CD19与CD206双特异性抗体，其特征在于，所述抗体包括特异性结合CD19的表位的第一多肽链以及特异性结合CD206的表位的第二多肽链和第三多肽链；所述第二多肽链分别与所述第一多肽链、第三多肽链彼此共价结合，

其中，

（1）所述第一多肽链依次包括氨基酸序列为SEQ ID NO.1的Anti-CD19信号肽、氨基酸序列为SEQ ID NO.3的Anti-CD19-scFv的重链可变区、氨基酸序列为SEQ ID NO.5的Anti-CD19-scFv的轻链可变区，氨基酸序列为SEQ ID NO.7的Anti-CD19-CH2以及氨基酸序列为SEQ ID NO.9的Anti-CD19-CH3，其中Anti-CD19-scFv的重链可变区与Anti-CD19-scFv的轻链可变区彼此通过氨基酸序列为SEQ ID NO.27的肽接头连接；

（2）所述第二多肽链依次包括氨基酸序列为SEQ ID NO.11的Anti-CD206重链信号肽、氨基酸序列为SEQ ID NO.13的Anti-CD206-VH、氨基酸序列为SEQ ID NO.15的Anti-CD206-CH1、氨基酸序列为SEQ ID NO.17的Anti-CD206-CH2和氨基酸序列为SEQ ID NO.19的Anti-CD206-CH3；

（3）所述的第三多肽链依次包括氨基酸序列为SEQ ID NO.21的Anti-CD206轻链信号肽、氨基酸序列为SEQ ID NO.23的Anti-CD206-VL、氨基酸序列为SEQ ID NO.25的Anti-CD206-CL。

2.权利要求1所述的抗人CD19与CD206双特异性抗体的制备方法，其特征在于，所述方法包括：

（1）根据权利要求1所述抗体的结构域的核酸片段序列构建双特异性抗体真核表达载体；

（2）将所述真核表达载体导入宿主细胞中表达。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述真核表达载体是利用自剪切2A肽系统构建的。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述载体构建拼接顺序为编码第一多肽链的核酸片段-2A肽-编码第二多肽链的核酸片段-2A肽-编码第三多肽链的核酸片段。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述2A肽选自F2A、T2A或E2A。

6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述的宿主细胞是293F细胞。

7.含有编码权利要求1所述的抗人CD19与CD206双特异性抗体的核苷酸序列的重组表达载体。

8.含有权利要求7所述的重组表达载体的宿主细胞。

9.权利要求1所述的抗体、权利要求2-6任一项所述的制备方法制得的抗体或权利要求7所述的重组表达载体在制备抗肿瘤药物中的应用。