[发明专利]一种姜辣素类成分含量高效液相检测方法

说明书

本发明提供了一种姜辣素类成分含量高效液相检测方法。该技术方案首先分析了姜辣素类成分在HPLC检测中的响应特点，在此基础上设计了特定的检测方法。具体来看，本发明首先以甲醇溶液分别配制待测样品和对照品溶液，在此基础上，以直链淀粉‑三(3‑氯‑5‑甲基苯基氨基甲酸酯)为填充剂进行柱层析，采用乙醇‑磷酸盐溶液和乙腈作为流动相，柱温34～38℃，检测波长330～350nm，流速0.3～0.6mL/min，进样量30μL；采用线性梯度洗脱，检测后采用内标法以峰面积计算含量。本发明操作简便，使检测效率得到显著提高，而且流程易于标准化，响应灵敏，准确性高，具有良好的推广前景和突出的技术优势。

技术领域

本发明涉及分析化学技术领域，具体涉及一种姜辣素类成分含量高效液相检测方法。

背景技术

姜辣素是姜酚、姜脑等与生姜有关辣味物质的总称。对姜辣素的组分研究迄今巳有一百多年的历史，1969年分离出姜酚的结晶体，并确认姜酚是由系列类似化合物组成。这些化合物为[4]-、[6]-、[8]-、[10]-、[12]-姜酚，其中[6]-姜酚含量最高。至此，姜辣素的主要组分已较清楚了，是由多种物质构成的混合物，各组分物质的分子结构中均含有：3-甲氧基-4-羟基苯基官能团，根据该官能团所连接烃链的不同，可把姜辣素分为姜酚、姜烯酚，副姜油酮、姜酮、姜辣二酮、姜辣二醇等不同类型。明确的姜酚类物质有十多种，包括[6]-、[8]-、[10]-、[12]-姜酚等，这些成分的性质、结构类似，其分子结构中都有C3--羰基和C5-羟基(即β-羟基酮结构)，该结构特点使得姜酚的化学性质极不稳定。例如，在酸性条件下(ph小于4.5下，C4的活泼氢极易与C5的羟基一起脱水形成姜烯酚；在加热或碱性条件下，C4和C5的羟基一起脱水形成姜烯酚间的碳碳键断裂形成姜酮和相应的醛。

姜酚分子中的酚羟基、羰基、羟基官能团使姜酚具有一般酚类、酮类、仲醇类物质的共性，能够发生这些化合物的一般化学反应。侧链的长短、3，5位上的乙酰氧基、芳香环上甲氧基、酚羟基官能团均影响姜酚的生物活性。现认为姜烯酚和姜酮在生姜中含量极少，是姜在贮存加工过程中姜酚脱水而成。在通常情况下，姜酚和姜烯酚为黄色油状液体，易溶于乙醚、甲醇、乙醇、丙酮等有机溶剂，不溶于水和酸，微溶于碱中。姜酚在己烷中得到的晶体熔点在51～151之间。重结晶可以得到包括[6]-、[8]-、[10]--姜酚混合物，其重量比为53：17：30。此结果和姜酚在强碱溶液中加热水解产生的己醛、辛醛、癸醛的比例一致。姜烯酚在氢氧化钠溶液中加热时可以发生分解反应，生成姜酮和一些挥发性的醛，主要为己醛和辛醛。姜酚在210，230，2800，111处有紫外吸收峰，其中280nm为姜酚的特征吸收峰。姜酚还具有荧光特性，激发波长435nm，发射波长482nm。现有技术中，用于姜辣素类成分的常规检测方法准确性较低，且操作相对繁琐，难以满足实际需要。

发明内容

本发明旨在针对现有技术的技术缺陷，提供一种姜辣素类成分含量高效液相检测方法，以解决常规检测方法操作繁琐、准确性较低的技术问题。

为实现以上技术目的，本发明采用以下技术方案：

一种姜辣素类成分含量高效液相检测方法，包括以下步骤：

1)取待测样品，利用80％浓度的甲醇溶液稀释至0.6～80mg/mL，作为待测溶液；另取姜辣素标准品，加80％甲醇溶液稀释成若干已知浓度的对照品溶液；

2)以如下色谱条件执行检测：填充剂为直链淀粉-三(3-氯-5-甲基苯基氨基甲酸酯)；流动相A：乙醇-磷酸盐溶液，其中乙醇的体积浓度为40％～50％，所述磷酸盐溶液中同时含有0.2mol/L的KH₂PO₃和0.36mol/L的K₂HPO₃；流动相B：乙腈；流动相A与流动相B的体积比为30∶40～20∶70；检测器：蒸发光散射检测器；柱温：34～38℃；检测波长：330～350nm；流速：0.3～0.6mL/min；

3)分别取待测溶液和对照品溶液30μL，进样后记录液相色谱图，采用内标法以峰面积计算。