[发明专利]一种甲状旁腺功能减退症大鼠模型的构建方法

权利要求书

1.一种甲状旁腺功能减退症大鼠模型的构建方法，其特征在于，具体步骤如下：

S1、选用成年SD大鼠进行适应性饲养；

S2、准确探查甲状旁腺并进行甲状旁腺切除术；

所述准确探查甲状旁腺的技术方法包括纳米炭负显影技术、甲状旁腺素检测试剂术中检测、冰冻切片快速病理学检查的方法；

S3、逐层缝合颈前肌群及皮肤，复苏大鼠。

2.根据权利要求1所述的一种甲状旁腺功能减退症大鼠模型的构建方法，其特征在于，所述甲状旁腺切除术的操作包括：

1)0.5％戊巴比妥钠35～40mg/kg腹腔注射麻醉；

2)仰卧位，颈部备皮，常规碘伏消毒；在10倍解剖显微镜下沿颈正中线剪开皮肤，深面可见左右各一的颌下腺；

3)在颌下腺间锐性分离暴露胸骨舌骨肌：沿中线钝性分离，牵引打开胸骨舌骨肌，可见暗红色的甲状腺呈蝴蝶样位于甲状软骨和2～3气管环两侧，将甲状腺外侧的胸骨甲状肌钝性分离显露其覆盖的甲状腺部分；

4)综合应用纳米炭负显影技术、甲状旁腺素检测试剂术中检测、冰冻切片快速病理学检查的方法准确探查甲状旁腺并予准确切除，行标本切除后常规病理确认。

3.根据权利要求2所述的一种甲状旁腺功能减退症大鼠模型的构建方法，其特征在于，所述纳米炭负显影技术查找甲状旁腺方法，操作如下：

用1ml注射器将0.1-0.2ml纳米碳混悬注射液注射于大鼠甲状腺内，注射时先回抽证实不误入血管；注射后用纱布及时按压注射部位1分钟；等待3-5 分钟后，甲状腺及颈部甲状腺周围的淋巴结会黑染，微白色梭形的甲状旁腺位于甲状腺表面的外上部，不被黑染，从而达到辨别甲状旁腺。

4.根据权利要求3所述的一种甲状旁腺功能减退症大鼠模型的构建方法，其特征在于，根据纳米炭负显影技术负显影所指示的疑似甲状旁腺并综合其形态及颜色判断进行标记，1mL无菌注射器刺破疑似的甲状旁腺包膜，反复抽吸腺体，将抽取的少量液体滴入试纸孵育3min，并采用PTH免疫检测仪定量检测PTH水平，若结果未超过60pg/mL，则为非甲状旁腺；若结果高于60pg/mL则为甲状旁腺，予以切除，进行初步辨别甲状旁腺；

初步辨别甲状旁腺后，尖剪刀予切取小部分组织行冰冻切片快速病理学检查，染色并观察其形态学，确认甲状旁腺，予完整切除，压迫止血；

取甲状腺组织标本用10％甲醛溶液固定、石蜡包埋切片HE染色，行常规石蜡切片病理确认。

5.根据权利要求4所述的一种甲状旁腺功能减退症大鼠模型的构建方法，其特征在于，所述S3操作如下：继续饲养大鼠并成活，观察术后大鼠是否出现出现懒动，淡漠等精神变化，以及进食量、饮水量和活动情况，有无抽搐，四肢有无强直，是否出现弓背情况，并测定其血清钙、甲状旁腺激素水平，较术前甲状旁腺素、血钙大幅下降，即为构建的甲状旁腺功能减退症大鼠模型。