[发明专利]一株防治褐梗天牛的层生镰刀菌及其应用

说明书

本发明公开了一株防治褐梗天牛的层生镰刀菌及其应用。本发明自山东省日照五莲山采集的被真菌感染死亡的褐梗天牛上分离菌株，经浸置法筛选到对褐梗天牛致死率最高的菌株层生镰刀菌(Fusarium proliferatum)CS‑03，该菌株保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.23235。该菌株对褐梗天牛具有显著的杀虫活性，且易于发酵生产，与化学合成杀虫剂相比，对环境绿色友好，且能够有效降低褐梗天牛为媒介的松材线虫病传播。

技术领域

本发明涉及一株防治褐梗天牛的层生镰刀菌及其应用，属于微生物农药技术领域。

背景技术

松材线虫病(Bursaphelench xylophilus)具有松树“癌症”之称，其疫情逐年扩大，在造成重大经济损失的同时，也严重威胁到我国的森林生态安全。松材线虫不能自己传播，只能依靠昆虫等媒介进行扩散。褐梗天牛(Arhopalus rusticus Linnaeus)恰恰是传播松材线虫的媒介昆虫，同时也是危害松树的主要蛀干害虫。因此，防治褐梗天牛对于降低松材线虫病传播及保护森林生态安全具有重要意义。

诱捕器诱杀、营林防治和化学防治是目前防治褐梗天牛的主要方法，这些方法费时费力、成本高或污染环境，并不是防治褐梗天牛的长久之计！与之相比，微生物农药具有易于发酵生产、对环境绿色友好且无农药残留等优势，已经成为生物防治的重要手段。截止目前，应用微生物防治褐梗天牛的研究在国内外报道较少。

专利CN109362791A公开了一种防治天牛虫害的生物杀虫剂及其制备方法，该生物杀虫剂由如下质量份数的组分制成：球孢白僵菌培养液75～85份，印楝素溶液的500倍稀释液40～50份，乳化剂2～4份，无水乙醇1～3份。专利CN112280691A公开了一种用于防治桃红颈天牛的球孢白僵菌及其应用，菌株保藏编号为CGMCC No.20250，其对桃红颈天牛成虫和幼虫均有较好的杀虫活性。专利CN112920956A公开了一株球孢白僵菌BD01菌株及其发酵方法和应用，菌株保藏编号为CGMCC No.21463，球孢白僵菌BD01的杀虫谱广泛，对落叶松八齿小蠹、榆小蠹、松大蚜、美国白蛾、落叶松毛虫、双条杉天牛及光肩星天牛都有较显著的杀伤效果。可见，目前在防治天牛虫害方面以球孢白僵菌居多，未见防治褐梗天牛的层生镰刀菌的报道。

发明内容

针对上述问题，本发明提供了一株防治褐梗天牛的层生镰刀菌及其应用，该菌株为层生镰刀菌(Fusarium proliferatum)CS-03，具有显著的杀虫活性，褐梗天牛的死亡率接近80％，可以开发为生物农药，与化学合成杀虫剂相比，对环境绿色友好，且能够有效降低褐梗天牛为媒介的松材线虫病传播。

本发明的上述目的是通过以下技术方案实现的：本发明所提供的菌株为CS-03，分离自山东省日照五莲山采集的被真菌感染死亡的褐梗天牛，是经浸置法从18株菌株中筛选到的对褐梗天牛的致死率最高(90％以上)的菌株，结合形态学及基因序列测定结果，鉴定该菌株为层生镰刀菌(Fusarium proliferatum)。该菌株已于2021年9月18日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏编号为CGMCC NO.23235。该层生镰刀菌(Fusarium proliferatum)CS-03在PDA平板上菌丝平均生长速度为7.5mm/d；菌落呈规则圆形，前期菌落为白色毛絮状；后期，菌落表面产生橘黄色和紫色色素，菌落背面产生紫色色素；摇瓶培养液有球形沉淀，有淡紫色色素产生，液面未见气泡。

本发明的另一个目的是提供层生镰刀菌(Fusarium proliferatum)CS-03在防治褐梗天牛中的应用以及防治松材线虫病传播方面的应用。