[发明专利]一种尿液中外泌体的富集方法

权利要求书

1.一种尿液中外泌体的富集方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、将尿液进行低速离心，保留上清液为待测尿液样本；

S2、向待测尿液样本中加入结合缓冲液及硅铝酸盐材料，得到混悬液；

S3、将所述混悬液孵育后，进行高速离心，去除上清液，保留沉淀Ⅰ；

S4、采用清洗缓冲液重悬所述沉淀Ⅰ得到重悬液，将所述重悬液高速离心后去除上清，保留沉淀Ⅱ，重复该步骤数次，最后得到包含外泌体的沉淀。

2.根据权利要求1所述的尿液中外泌体的富集方法，其特征在于，步骤S1中，所述低速离心的条件如下：离心力为200～10,000g，温度为2～26℃，时间为1～60分钟。

3.根据权利要求1所述的尿液中外泌体的富集方法，其特征在于，步骤S2中，所述结合缓冲液成分包括Tris、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、磷酸钾、磷酸、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸钠、氯化钾、氯化钠、柠檬酸、柠檬酸钠、巴比妥酸、巴比妥钠、氢氧化钠、盐酸、EDTA、SDS、NP-40、CHAPS、吐温、Triton、PEG、乙腈、甲醇中的一种或任意组合。

4.根据权利要求1所述的尿液中外泌体的富集方法，其特征在于，步骤S2中，所述硅铝酸盐材料选自3A型、4A型、5A型、10Z型、13Z型、Y型或丝光沸石型中的一种或几种的混合物，或者某一类型中几种的混合物。

5.根据权利要求1所述的尿液中外泌体的富集方法，其特征在于，步骤S2中，所述硅铝酸盐材料选自NaY、USY和丝光沸石的混合物，优选三者的质量比为NaY：USY：丝光沸石＝1：1：1。

6.根据权利要求1所述的尿液中外泌体的富集方法，其特征在于，步骤S3中，所述孵育的条件为：18～37℃下孵育1～120分钟；所述高速离心的条件如下：离心力为2,000～22,000g，温度为2～26℃，时间为1～120分钟。

7.根据权利要求1所述的尿液中外泌体的富集方法，其特征在于，步骤S4中，所述清洗缓冲液选自步骤S1所使用的结合缓冲液或相应稀释液；所述高速离心的条件如下：离心力为2,000～22,000g，温度为2～26℃，时间为1～120分钟；该步骤可重复3次。