[发明专利]一种重组融合蛋白及其制备治疗炎症性肠病药物的应用

说明书

本发明公开了一种重组融合蛋白及其制备治疗炎症性肠病药物的应用，其具有如SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列。所述的重组融合蛋白用于制备治疗溃疡性结肠炎和/或克罗恩病药物的应用。通过氨基酸突变，筛选到了PDAP1^YDPE突变能够显著提高PDAP1蛋白的稳定性，并且采用重组PDAP1^YDPE蛋白灌肠治疗能够显著缓解小鼠结肠炎症，提示重组PDAP1^YDPE蛋白在炎症性肠病治疗中具有潜在的应用价值。

技术领域

本发明属于基因工程领域，具体涉及一种重组融合蛋白及其制备治疗炎症性肠病药物的应用。

背景技术

溃疡性结肠炎是一种病因未明的慢病炎症性肠病，主要累及结肠和直肠。从全球来看，溃疡性结肠炎的发病率的患病率逐年增加。目前，中国溃疡性结肠炎患病率已超过11.6/10万，发病高峰年龄为20～49岁。此外，随着溃疡性结肠炎病变的持续进展、病程迁延不愈，患者的不良预后风险也在不断增加，如结直肠癌风险明显增高、结构性肠损伤、更易抑郁焦虑等。由于存在肠腔狭窄、肠蠕动障碍、肛门直肠功能障碍、发生癌变等风险，溃疡性结肠炎被认为是一种进行性疾病，其治疗策略也从对症治疗转变为促进黏膜愈合，研究表明组织学缓解与更低的住院、结肠切除、癌变风险相关。

目前，溃疡性结肠炎的治疗主要在于抑制肠道炎症，然而，现有的治疗手段包括氨基水杨酸、糖皮质激素、免疫抑制剂或生物制剂等，在安全性和有效性方面，都有不尽如人意之处。溃疡性结肠炎患者的10年累积复发率高达70％～80％，近50％的患者需要住院治疗，5年再住院率为50％，确诊后5年和10年的结肠切除率为10％～15％。因此，开发新的溃疡性结肠炎治疗药物具有重要意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种重组融合蛋白及其制备治疗炎症性肠病药物的应用，该重组融合蛋白通过基因工程方法获得，经过实验证实，该重组蛋白能够用于制备治疗炎症性肠病药物的应用。

具体技术方案包括：

一种重组融合蛋白，其具有如SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列。

一种重组融合蛋白，其由如SEQ ID NO：2所示的基因序列编码得到。

一种重组融合蛋白，为人PDAP1^YDPE重组融合蛋白，氨基端融合有6×His标签，羧基端含有4个氨基酸突变，突变氨基酸残基为K105Y、E106D、R109P和R110E。

本发明所述的重组融合蛋白用于制备治疗炎症性肠病药物的应用。

一种重组载体，将PDAP1^YDPE融合基因片段利用限制性酶切位点NdeI/EcoRI将其插入pET-22b(+)表达载体(Merck,NJ,USA)；

PDAP1^YDPE融合基因片段如SEQ ID NO：2所示。

一种大肠杆菌，所述的大肠杆菌为Escherichia coli strain BL21(DE3)，其内转化有本发明所述的重组载体。

一种治疗溃疡性结肠炎的药物，含有本发明所述的重组融合蛋白。

一种治疗克罗恩病的药物，含有本发明所述的重组融合蛋白。

一种治疗炎症性肠病的药物，含有本发明所述的重组融合蛋白。

本发明的优点为：

本发明通过氨基酸突变，筛选到了PDAP1^YDPE突变能够显著提高PDAP1蛋白的稳定性，并且采用重组PDAP1^YDPE蛋白灌肠治疗能够显著缓解小鼠结肠炎症，提示重组PDAP1^YDPE蛋白在炎症性肠病治疗中具有潜在的应用价值。

附图说明