[发明专利]一种怀牛膝根部消毒表面并分离培养其内生真菌的方法

权利要求书

1.一种怀牛膝根部表面消毒的方法，其特征在于，包括以下步骤:

选取1年生的健康的怀牛膝，采集根部依次采用75％乙醇浸泡30-50s,3-5wt％次氯酸钠振荡洗涤6-8min,无菌水漂洗3-5次进行消毒处理。

2.根据权利要求1所述的怀牛膝根部表面消毒的方法，其特征在于，对根部依次采用75％乙醇浸泡30s,3wt％次氯酸钠振荡洗涤6min,无菌水漂洗3次进行消毒处理。

3.根据权利要求1所述的怀牛膝根部表面消毒的方法，其特征在于，对根部依次采用75％乙醇浸泡40s,4wt％次氯酸钠振荡洗涤7min,无菌水漂洗4次进行消毒处理。

4.根据权利要求1所述的怀牛膝根部表面消毒的方法，其特征在于，对根部依次采用75％乙醇浸泡50s,4wt％次氯酸钠振荡洗涤8min,无菌水漂洗5次进行消毒处理。

5.一种怀牛膝根部内生真菌的分离培养方法，其特征在于，包括以下步骤:将经权利要求1消毒处理后的材料的周围组织切剪丢弃，将剩余的中部组织接种到含青霉素和链霉素且含有怀牛膝浸提液的PDA培养基。

6.根据权利要求5所述的怀牛膝根部内生真菌的分离培养方法，其特征在于，中部组织剪成1.5-2.5mm的小段根。

7.根据权利要求5所述的怀牛膝根部内生真菌的分离培养方法，其特征在于，含青霉素和链霉素的PDA培养基由PDA培养基中加入0.03-0.150g/L青霉素和0.02-0.125g/L链霉素得到。

8.根据权利要求5所述的怀牛膝根部内生真菌的分离培养方法，其特征在于，含青霉素和链霉素以及怀牛膝根部浸提液的PDA培养基中怀牛膝根部浸提液含量为80-120mL/L,青霉素和链霉素的含量分别为0.03-0.150g/L和0.02-0.125g/L。