[发明专利]用于组织修复的改性非对称SIS膜、其制备方法及应用

说明书

本公开涉及一种用于组织修复的改性非对称SIS膜、其制备方法及应用。具体来说，本公开涉及一种组合物，所述组合物含有融合多肽修饰的非对称SIS膜和外泌体，以及所述组合物的制备方法和应用。本公开证实了融合多肽介导的非对称SIS膜以及含有前述非对称SIS膜和外泌体的组合物具有优异的生物功能，外泌体在非对称SIS膜上的负载率显著提高，为骨组织的愈合、重塑提供合适的微环境，具有显著提高的诱导骨再生能力。

技术领域

本公开属于生物医用材料领域，具体涉及一种用于组织修复的改性非对称SIS膜、其制备方法及应用。

背景技术

创伤、炎症和肿瘤等疾病是造成组织损伤的常见原因，组织损伤的修复需要提供适于细胞增殖、迁移的微环境。对于骨组织修复，基于屏障膜的引导骨再生(guided boneregeneration，GBR)技术获得了广泛的应用。GBR技术应用屏障膜(又称，GBR膜)覆盖骨缺损，在骨愈合过程中排除来自非成骨组织的干扰，同时为骨再生提供有利环境，以促进骨组织地再生。

GBR膜是决定GBR技术应用效果的主要因素之一，目前，GBR膜可分为可吸收GBR膜与不可吸收GBR膜。不可吸收GBR膜由聚四氟乙烯、钛等材料形成，其需要二次手术取出，患者的痛苦和花费较多。可吸收GBR膜采用胶原、聚乳酸等可吸收材料制成，因其使用方便且无需二次手术切除而被广泛使用。目前，具有可吸收性的Bio-Gide膜是一种具有非对称结构的仿生层状膜，其朝向软组织的致密层充当屏障以防止成纤维细胞侵入骨缺损；面向骨缺损的多孔层具有高孔隙率，可以促进成骨细胞粘附和稳定血栓。目前，Bio-Gide膜已应用于临床，并取得了积极的治疗效果。然而，Bio-Gide膜缺乏生物活性物质，其诱导骨再生的能力存在不足。

细胞外基质(ECM)材料是用于组织修复重建的良好基质；由于其非细胞生物网络，近年来已成为组织工程技术的一种重要的支架材料。小肠粘膜下层(SIS)是一种性能优异的ECM材料，具有低免疫原性、优异的机械性能和组织再生能力。因此，SIS膜被广泛应用于皮肤、心血管、腹壁、软骨缺损等受损组织的修复，并取得了满意的效果。

利用外泌体与SIS膜结合，可获得具有良好组织诱导特性的SIS材料。但是，由于SIS膜质地致密，难以为骨细胞生长提供适当的生长空间，目前只有少数研究使用SIS材料用作GBR膜。因此，如何实现对SIS膜的材料改性，是目前亟需解决的重要问题。

发明内容

发明要解决的问题

鉴于现有技术中存在的问题，例如，外泌体向SIS膜的加载存在加载效率低、体内突然释放和外泌体结构破坏等缺陷，以及SIS膜难以为骨细胞的迁移、增殖提供适合的生长空间。为此，本公开提供了一种有非对称结构SIS膜，非对称SIS膜的致密层能够有效隔离软组织，多孔层的多孔结构能够为骨细胞的黏附、增殖提供合适的三维空间，为成骨细胞的增殖和生长提供稳定的生长空间。并且，由于多孔层的高孔隙率以及通过融合多肽的介导，外泌体可稳定、高效负载于非对称SIS膜上，为骨组织的愈合、重塑提供合适的微环境，具有显著提高的诱导骨再生能力。

用于解决问题的方案

(1)一种组合物，其中，所述组合物含有融合多肽修饰的非对称SIS膜和外泌体；所述非对称SIS膜具有相背对的多孔层和致密层，至少一部分所述外泌体负载于所述多孔层的内部和/或表面。

(2)根据(1)所述的组合物，其中，所述融合多肽的序列包含由如下序列所示的序列组成的组中的至少一种：

(i)由如SEQ ID NO：5所示的序列、如SEQ ID NO：6所示的序列组成的组；

(ii)和(i)所示的序列相比，存在一个、两个、三个、四个或五个保守置换的序列；

优选地，所述融合多肽的序列由如下序列组成的组中的至少一种组成：