[发明专利]一种锰氧化菌及其筛选方法和应用有效

专利信息
申请号: 202111489885.2 申请日: 2021-12-08
公开(公告)号: CN114410503B 公开(公告)日: 2023-10-03
发明(设计)人: 廖骐;曹维;刘梓欣;杨志辉;杨卫春;司梦莹;李青竹;唐崇俭;唐溪;王海鹰 申请(专利权)人: 中南大学
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;C12P3/00;C12R1/01
代理公司: 长沙启昊知识产权代理事务所(普通合伙) 43266 代理人: 李儒
地址: 410083 湖南*** 国省代码: 湖南;43
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摘要:
搜索关键词: 一种 氧化 及其 筛选 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种锰氧化菌,其特征在于,

属于摩根氏菌属(Morganella Morganii),命名为MnOx-1,于2021年7月2日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.22815。

2.权利要求1所述的锰氧化菌的筛选方法,其特征在于,

包括:

S1、取污泥样本静置后的上清液,加入到含MnSO4·H2O和HEPES缓冲液的LB液体培养基中;

S2、恒温振荡培养5-9d后,通过LBB指示剂对培养基进行检验初筛。

3.根据权利要求2所述的锰氧化菌的筛选方法,其特征在于,

还包括:

S3、将步骤S2中对LBB指示剂显蓝色的培养液稀释涂布分离于含MnSO4·H2O和HEPES缓冲液的固体培养基中,恒温培养后,进一步通过LBB指示剂进行检验复筛,将对LBB指示剂显蓝色的进行分离和纯化,将得到的菌株与甘油按1∶1混匀后在-80℃下保藏。

4.根据权利要求2或3所述的锰氧化菌的筛选方法,其特征在于,

步骤S1中,LB液体培养基包括以下组分:

胰蛋白胨10g,酵母浸粉5g,氯化钠5g,蒸馏水1000m1,pH为7,MnSO4·H2O 1mmol/L,HEPES缓冲液20mmol/L。

5.根据权利要求2或3所述的锰氧化菌的筛选方法,其特征在于,

步骤S2中,LBB指示剂的配制方法如下:

称取0.04g LBB粉末,将其溶解于0.25ml的45mmol/L冰乙酸水溶液中,加入去离子水,定容至100ml,4℃避光保存。

6.根据权利要求3所述的锰氧化菌的筛选方法,其特征在于,

步骤S3中,含MnSO4·H2O和HEPES缓冲液的固体培养基的配置方法如下:

将胰蛋白胨10g、酵母浸粉5g、氯化钠5g和琼脂15g溶于1000ml的蒸馏水中,调节pH为7,于灭菌锅121℃下灭菌20min,使用0.22μm滤头过滤加入1mol/L MnSO4·H2O和1mol/L HEPES缓冲液,使得Mn2+和HEPES缓冲液的最终浓度分别为1mmol/L和20mmol/L,冷却至50℃后,于无菌操作台倒平板,固体平板冷凝后备用。

7.一种含有权利要求1所述的锰氧化菌的菌剂。

8.权利要求1所述的锰氧化菌或权利要求7所述的菌剂在制备氧化三价砷的生物锰氧化物中的应用。

9.权利要求1所述的锰氧化菌或权利要求7所述的菌剂在氧化三价砷中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,

所述锰氧化菌通过氧化Mn2+制得生物锰氧化物,通过生物锰氧化物将三价砷氧化为五价砷。

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