[发明专利]一种苦参子中的水溶性化合物的分离方法

权利要求书

1.一种苦参子中的水溶性化合物的分离方法，其特征在于，所述方法包括脱脂步骤、溶剂提取步骤、大孔树脂柱层析步骤、中压纯化制备步骤和高效液相色谱制备步骤，其中所述水溶性化合物为γ-L-谷氨酰-L-酪氨酸和番石榴酸，

其中，所述脱脂步骤包括以下步骤：

(1)称取适量的苦参子粉末，加入第一溶剂后浸泡6至10小时，超声30至60分钟，过滤后的滤渣为第一脱脂粉；以及

(2)在所述第一脱脂粉中加入第一溶剂后浸泡6至10小时，超声30至60分钟，过滤后的滤渣为第二脱脂粉；

其中，所述第一溶剂为石油醚和/或正己烷，

其中，所述溶剂提取步骤包括以下步骤：

(1)称取适量的所述第二脱脂粉，加入第二溶剂后超声30至60分钟，过滤，得到第一滤液；

(2)在所述第二脱脂粉中加入第三溶剂后超声30至60分钟，过滤，得到第二滤液；以及

(3)合并所述第一滤液和所述第二滤液，离心后取上清液，得到苦参子提取液；

其中，所述第二溶剂和所述第三溶剂为水；

其中，所述大孔树脂柱层析步骤包括以下步骤：

(1)将所述苦参子提取液添加至大孔树脂柱中，其中上样过程中未吸附的部分为未吸附流分；

(2)添加水进行洗脱，得到水洗脱流分；以及

(3)将所述未吸附流分和所述水洗脱流分合并后，浓缩干燥，得到第一干燥物；

其中，所述大孔树脂为HPD400大孔吸附树脂、HPD600大孔吸附树脂、D201大孔吸附树脂或D301大孔吸附树脂；

其中，所述中压纯化制备步骤包括以下步骤：

(1)称取适量的所述第一干燥物，溶于水中，制成浓度为300mg/mL至500mg/mL的第一样品溶液；以及

(2)所述第一样品溶液采用中压纯化制备色谱仪，通过ODS中压制备柱进行柱层析，合并含有所述水溶性化合物的流分，干燥，得到第二干燥物；

其中，所述ODS中压制备柱进行柱层析的流动相为甲醇-0.05％甲酸水溶液约15:85，所述ODS中压制备柱进行柱层析的检测波长为约225nm；

其中，所述高效液相色谱制备步骤包括以下步骤：

(1)称取适量的所述第二干燥物，溶于水中，制成浓度为60mg/mL至100mg/mL的第二样品溶液；以及

(2)所述第二样品溶液采用制备型高效液相色谱系统，通过ODS制备色谱柱进行柱层析，分别合并含有所述γ-L-谷氨酰-L-酪氨酸的流份和含有所述番石榴酸的流分，干燥，得到所述γ-L-谷氨酰-L-酪氨酸和所述番石榴酸；

其中，所述ODS制备色谱柱进行柱层析的流动相为甲醇-0.1％甲酸水溶液15:85，所述ODS制备色谱柱进行柱层析的检测波长为约225nm。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述苦参子粉末与所述第一溶剂的重量体积之比为1:3至1:10。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第一脱脂粉与所述第一溶剂的重量体积之比为1:3至1:10。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述苦参子粉末与所述第一溶剂的重量体积之比为约1:5。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述第一脱脂粉与所述第一溶剂的重量体积之比为约1:5。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述浸泡的时间为约8小时。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述脱脂步骤中的所述超声的时间为约45分钟。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述脱脂步骤中的所述超声的功率为200W至300W。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述脱脂步骤中的所述超声的频率为30KHz至60KHz。

10.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，在所述脱脂步骤中的所述超声的功率为约250W。