[发明专利]一种HMPB的制备方法、普鲁士蓝基荧光探针及其制备方法

说明书

本发明提供了一种HMPB的制备方法、普鲁士蓝基荧光探针及其制备方法，包括将FITC与去离子水混合超声，均匀后加入HMPB，再次超声均匀后得到混合液；放入恒温振荡器，孵育过夜；离心、洗涤，将所得沉淀分散在去离子水中，即可得到加载有FITC的HMPB。本发明可应用于水溶液以及细胞内的检测，具有较快的响应时间、较好的选择性和灵敏度，在体外检测以及胞内成像中具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明涉及荧光纳米探针领域，具体地说，涉及一种用于次氯酸检测的HMPB的制备方法、普鲁士蓝基荧光探针及其制备方法。

背景技术

人体内许多的生理及病理过程需要活性氧(ROS)或活性氮(RNS)的参与。次氯酸(HClO/ClO^-)是人体内最重要的ROS之一，在不同的生理以及各种病理过程中起着关键作用。内源性HClO/ClO^-是由髓过氧化物酶(MPO)在人体内中催化H₂O₂促进氯离子(Cl^-)的过氧化产生的。在正常浓度下，HClO/ClO^-作为免疫防御过程的一部分，发挥着清除侵入性细菌和病原体的重要作用。然而，过量的HClO/ClO^-会通过氧化或氯化作用破坏正常组织细胞的核酸、蛋白质和脂质等的结构，导致组织损伤。这些组织损伤大多与炎症、动脉粥样硬化、阿尔茨海默病、癌症等疾病有关。

普鲁士蓝纳米材料本身具有优异的磁共振造影和光热疗功能，中空介孔普鲁士蓝纳米颗粒(HMPB)作为药物载体被广泛应用于可控的药物扩散。

因此，开发一种可针对次氯酸进行实时检测成像的基于普鲁士蓝的反应型荧光探针，对于进一步探究其生理功能及与重大疾病病理过程的内在关系具有重要意义。

发明内容

针对现有技术中的问题，本发明的目的在于提供一种可用于次氯酸检测的HMPB的制备方法、普鲁士蓝基荧光探针及其制备方法。

根据本发明的一方面，提供了一种HMPB的制备方法，包括以下步骤：

步骤1，将聚吡咯烷酮与水混合，搅拌均匀后滴加盐酸，使其pH＝2，继续搅拌均匀后加入铁氰化钾，再次搅拌均匀；

步骤2，将步骤1所得溶液置于聚四氟乙烯反应釜中，加热反应后，自然冷却至室温；随后进行离心、洗涤，取初步沉淀定量；

步骤3，取步骤2所得初步沉淀分散在水中，加入聚吡咯烷酮，搅拌均匀后加入盐酸；

步骤4，将步骤3的混合液倒入聚四氟乙烯内衬中，加热反应后冷却至室温；随后进行离心、洗涤，取沉淀即得HMPB。

优选的：所述步骤1中的聚吡咯烷酮、水、铁氰化钾的质量比为5～10:60～100:0.1～0.2。

优选的：所述步骤2中的加热温度为80～100℃，加热时间为1.5～3h。

优选的：所述步骤3中的初步沉淀、聚吡咯烷酮、去离子水的质量比为1:10～20:800～1000。

优选的：所述步骤3中的盐酸浓度为1～2M。

优选的：所述步骤4中的加热温度为100～150℃，加热时间为1～3h。

优选的：所述步骤2和步骤4中均采用质量比为1:1的乙醇与水的混合溶液洗涤。

根据本发明的另一方面，提供了一种普鲁士蓝基荧光探针：包括如上所述的HMPB，所述HMPB中加载有FITC。

根据本发明的另一方面，提供了一种如上述的普鲁士蓝基荧光探针的制备方法：包括以下步骤：

步骤1，将FITC与去离子水混合超声，均匀后加入HMPB，再次超声均匀后得到混合液；