[发明专利]一种核酸酶去除核黄素中的残留DNA的方法

权利要求书

1.一种核酸酶去除核黄素中的残留DNA的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1.调浆：将核黄素粗品加入到水中，搅拌均匀形成核黄素悬浊液，并调整温度恒定在25～45℃之间；

步骤2.调pH：检测核黄素悬浊液pH，并依据检测结果向核黄素悬浊液中加入盐酸或氢氧化钠溶液，调节pH稳定在6～10；

步骤3.超声：保持搅拌及温度为25～45℃，向核黄素悬浊液施加90～110W功率的超声并持续2～5h，然后调整超声功率至60～90W；

步骤4.酶解：保持温度稳定为25～45℃、pH稳定为6～10、超声功率稳定为60～90W，向核黄素悬浊液内加入全能核酸酶进行酶解反应，所述加入的全能核酸酶与核黄素粗品的比例为1：10³～1：10⁷，至反应完成，反应完成所需时间为3～6h；

步骤5.再调pH：依据步骤2的pH调节结果向核黄素悬浊液中加入盐酸或硫酸溶液，调节pH稳定在3～5；

步骤6.超声：保持搅拌及温度，向核黄素悬浊液施加100～200W功率的超声并持续1～2h，然后调整超声功率；

步骤7.再酶解：调整温度稳定至50～70℃，并保持pH稳定为3～5、超声功率稳定为100～200W，向核黄素悬浊液内加入5'-磷酸二酯酶进行酶解反应，所述加入的5'-磷酸二酯酶与核黄素粗品的比例为1：10³～1：10⁷，至反应完成，反应完成所需时间为2～3h；

步骤8.过滤：酶解反应完后，将核黄素悬浊液过滤，收集滤饼；

步骤9.喷雾干燥：将滤饼加入到水中，搅拌均匀形成核黄素悬浊液，再进行喷雾干燥，得到核黄素成品。

2.根据权利要求1所述的核酸酶去除核黄素中的残留DNA的方法，其特征在于：步骤1中核黄素粗品为发酵液经过酸化、碱溶、离心、过滤，去除了菌体及大部分蛋白质、核酸等杂质，但未精制的核黄素。

3.根据权利要求1所述的核酸酶去除核黄素中的残留DNA的方法，其特征在于：步骤1中核黄素粗品与水的比例为1：50～1：10。