[发明专利]一种生产四氢蒽类化合物的工程菌及生产蒽醌类化合物方法

权利要求书

1.一种用于发酵生产四氢蒽醌类化合物的工程菌，其特征在于，选自以下菌株：

(A)所述的四氢蒽醌类化合物为atrochrysone时，含有一个编码真菌非还原型重复使用的I型聚酮合酶的基因和一个编码β-内酰胺酶型硫酯酶的基因；

(B)所述的四氢蒽醌类化合物为决明蒽酮时，还含有一个编码蒽环C6-OH甲基转移酶的基因；

所述I型聚酮合酶的氨基酸序列为与SEQ ID No.2的氨基酸序列具有50％以上相似性且功能相同的蛋白质；所述β-内酰胺酶型硫酯酶与SEQ ID No.4的氨基酸序列具有50％以上相似性且功能相同的蛋白质；所述蒽环C6-OH甲基转移酶为与SEQ ID No.6的氨基酸序列具有50％以上相似性且功能相同的蛋白质。

2.根据权利要求1所述的工程菌，其特征在于，所述I型聚酮合酶含有如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列，所述β-内酰胺酶型硫酯酶含有如SEQ ID No.4所示的氨基酸序列，所述蒽环C6-OH甲基转移酶含有如SEQ ID No.6所示的氨基酸序列。

3.根据权利要求1所述的基因工程菌株，其特征在于所述的编码真菌非还原型重复使用的I型聚酮合酶的基因为与SEQ ID No.1具有50％以上相似性编码且功能相同蛋白质的核苷酸序列；所述编码β-内酰胺酶型硫酯酶的基因为与SEQ ID No.3具有50％以上相似性编码且功能相同蛋白质的核苷酸序列；所述编码蒽环C6-OH甲基转移酶的基因为与SEQ IDNo.5具有50％以上相似性编码且功能相同蛋白质的核苷酸序列。

4.根据权利要求1所述的工程菌，其特征在于，宿主细胞为真菌。

5.根据权利要求1或4所述的工程菌，其特征在于，宿主细胞为米曲霉、酿酒酵母、毕赤酵母、芽孢杆菌、米曲霉、构巢曲霉、黑曲霉、粗糙脉孢菌、交链格孢菌或镰刀菌中任一种。

6.一种制备四氢蒽醌类化合物的方法，其特征在于，用淀粉、麦芽糖或麦芽糖糊精诱导表达权利要求1-6任一项所述工程菌。

7.一种制备蒽醌类化合物的方法，其特征在于，步骤包括：

将四氢蒽类化合物用碱处理，反应2-6小时。

8.根据权利要求7所述的方法，所述的蒽醌类化合物为大黄素时，所述的四氢蒽类化合物为atrochrysone；所述的蒽醌类化合物为大黄素甲醚时，所述的四氢蒽类化合物为决明蒽酮。

9.根据权利要求7或8所述的方法，其特征在于，所述的四氢蒽类化合物通过如下方法制备：用淀粉、麦芽糖或麦芽糖糊精诱导表达权利要求1-6任一项所述工程菌，取发酵液或者发酵液提取物。

10.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，还包括：将碱处理后的混合液用酸中和、酸化，所述的酸为盐酸，与碱的摩尔比为0-5：1。