[发明专利]一种连续化生产磁性琼脂糖凝胶微球的方法在审

专利信息
申请号: 202111431018.3 申请日: 2021-11-29
公开(公告)号: CN113967451A 公开(公告)日: 2022-01-25
发明(设计)人: 尚超;陈历历;黄明贤;任辉 申请(专利权)人: 苏州海狸生物医学工程有限公司
主分类号: B01J13/00 分类号: B01J13/00
代理公司: 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 代理人: 吴晓静
地址: 215000 江苏省苏州市*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 连续 化生 磁性 琼脂 凝胶 方法
【说明书】:

本发明提供一种连续化生产磁性琼脂糖凝胶微球的方法,包括以下步骤:A)使用计量泵将水相储料罐中的水相和油相储料罐中的油相输送至预乳化反应釜中进行搅拌预乳化,得到预乳化液;所述水相包括琼脂糖、磁核、无机盐和水;所述油相包括乳化剂和有机溶剂;所述预乳化的搅拌速度为500~1800rpm;B)将所述预乳化液输送至乳化反应器中,进行高剪切乳化分散,得到乳化液;所述高剪切乳化分散的剪切速度为3000~15000rpm;C)将所述乳化液输送至冷却罐中进行冷却固化,得到磁性琼脂糖凝胶微球。本发明采用高剪切乳化技术,通过装置和管线设计,通过预乳化和高剪切乳化两个乳化步骤,实现了磁性琼脂糖凝胶微球的连续化制备。

技术领域

本发明属于生物制药材料技术领域,尤其涉及一种连续化生产磁性琼脂糖凝胶微球的方法。

背景技术

琼脂糖磁性微球作为一种特殊的生物分子固定化载体,能够在特殊化学试剂(如EDC)的作用下将多肽、蛋白、寡聚核苷酸等生物配体共价偶联到微球表面,还能够借助磁场的作用实现快速分离,从而大大减少操作步骤和时间,因此是医学与分子生物学研究中的一个重要载体工具,在细胞分离、蛋白纯化、核酸分离等领域具有广泛的应用。

现有琼脂糖磁性微球主要是通过乳化-固化法制备,其主要步骤是将琼脂糖和磁核加热溶解形成水相,之后加到含有乳化剂的有机溶剂中,通过机械搅拌或超声充分乳化后,降温固化得到琼脂糖磁性微球。中国专利CN200410000087公开了一种特制的膜乳化装置制备尺寸均一的琼脂糖微球的方法。然而,上述方法均属于间歇式制备,其制备规模往往受限,无法进行大规模放大;同时由于重复性较差,导致制备得到的磁性琼脂糖凝胶微球的批次间差异较大,无法对其质量进行有效的控制。因此,开发一种连续化生产磁性琼脂糖凝胶微球的方法具有重要意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种连续化生产磁性琼脂糖凝胶微球的方法,本发明中的方法工艺简单、易于操作、可控性好、重复性好、可连续化制备;制备得到的磁性琼脂糖凝胶微球球形度高、粒径均一、粒径分布系数小。

本发明提供一种连续化生产磁性琼脂糖凝胶微球的方法,包括以下步骤:

A)使用计量泵将水相储料罐中的水相和油相储料罐中的油相输送至预乳化反应釜中进行搅拌预乳化,得到预乳化液;

所述水相包括琼脂糖、磁核、无机盐和水;所述油相包括乳化剂和有机溶剂;

所述预乳化的搅拌速度为500~1800rpm;

B)将所述预乳化液输送至乳化反应器中,进行高剪切乳化分散,得到乳化液;

所述高剪切乳化分散的剪切速度为3000~15000rpm;

C)将所述乳化液输送至冷却罐中进行冷却固化,得到磁性琼脂糖凝胶微球。

优选的,所述磁核为Fe3O4磁核;所述无机盐为氯化钠、氯化钙和氯化钾中的一种或几种;

所述琼脂糖与磁核的质量比为10:(1~7.5);所述琼脂糖与无机盐的质量比为10:(0.1~0.4);所述琼脂糖与水的质量比为(2~8):100。

优选的,所述乳化剂为Span-85和/或Span-80;所述有机溶剂为正己烷、环己烷、甲苯和四氯化碳中的一种或几种;

所述乳化剂与有机溶剂的体积比为(2~4):100。

优选的,所述水相与油相的流量之比为1:(3~6)。

优选的,所述预乳化的温度为50~80℃;所述预乳化的时间为5~15min。

优选的,所述乳化的温度为50~70℃。

优选的,所述水相储料罐、油相储料罐、预乳化反应釜和乳化反应釜均设置有保温装置。

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