[发明专利]一种siRNA在牙髓干细胞成骨分化中的应用在审
| 申请号: | 202111423161.8 | 申请日: | 2021-11-26 |
| 公开(公告)号: | CN114107184A | 公开(公告)日: | 2022-03-01 |
| 发明(设计)人: | 艾冬梅;张瑜 | 申请(专利权)人: | 山东中医药大学第二附属医院 |
| 主分类号: | C12N5/077 | 分类号: | C12N5/077;C12N5/10;C12N15/113 |
| 代理公司: | 济南智圆行方专利代理事务所(普通合伙企业) 37231 | 代理人: | 王华 |
| 地址: | 250001*** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 sirna 牙髓 干细胞 分化 中的 应用 | ||
本发明公开了一种siRNA在牙髓干细胞成骨分化中的应用,属于干细胞技术领域。所述siRNA为LINC02192的siRNA,所述siRNA的序列为Sense:GGUGGAGGUUGCUAAGCAAAG;Antisense:UUGCUUAGCAACCUCCACCUG。使用本发明siRNA转染牙髓干细胞后,能够有效的促进牙髓干细胞的成骨分化相关蛋白的表达并能够有效的促进牙髓干细胞的成骨分化。
技术领域
本发明属于干细胞技术领域,尤其涉及一种用于牙髓干细胞成骨分化和增殖的siRNA。
背景技术
牙髓组织位于牙齿内部的牙髓腔内,是牙体组织中唯一的软组织。2000年Gronthos 等通过对人牙髓细胞的研究,发现了一种与骨髓间充质干细胞有着极其相似的免疫表型及形成矿化结节能力的细胞,细胞中形态呈梭形,可自我更新和多向分化,有着较强的克隆能力。这些由牙髓组织中分离出的成纤维状细胞就称为牙髓干细胞 (DentalPulp Stem Cells, DPSCs)。
牙髓干细胞具有多向分化的潜能,可以分化为各种细胞,如成骨细胞、成牙本质细胞、成软骨细胞、成脂肪细胞、神经细胞和成肌细胞。其中,将牙髓干细胞进行成骨分化诱导来修复牙齿,是牙髓干细胞的主要应用方向,因此实现牙髓干细胞的快速成骨诱导有助于牙髓干细胞的大规模医学应用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种用于促进牙髓干细胞成骨分化的siRNA。
为实现上述目的,本发明提供了如下技术方案:
其一,本发明提供了一种siRNA在制备牙髓干细胞成骨分化促进剂中的用途,所述siRNA为LINC02192的siRNA。
优选地,所述LINC02192的序列如SEQ ID NO.1所示。
优选地,所述siRNA的序列如SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示。
其二,本发明提供了一种用于促进牙髓干细胞成骨分化的siRNA,所述siRNA为LINC02192的siRNA。
优选地,所述LINC02192的序列如SEQ ID NO.1所示;所述siRNA的序列如SEQ IDNO.2和SEQ ID NO.3所示。
其三,本发明提供了一种siRNA在制备牙髓干细胞成骨分化相关蛋白ALP,RUNX2和OPN蛋白表达促进剂中的用途,所述siRNA为LINC02192的siRNA。
优选地,所述LINC02192的序列如SEQ ID NO.1所示;所述siRNA的序列如SEQ IDNO.2和SEQ ID NO.3所示。
其四,本发明提供了一种促进牙髓干细胞成骨分化的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)将原代培养或传代培养获得的牙髓干细胞接种于培养装置中;
(2)将LINC02192的siRNA导入到牙髓干细胞中,加入成骨诱导培养基进行培养。
优选地,所述siRNA的序列如SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示。
本发明的有益效果是:
本发明的有益效果在于本发明发现LINC02192的siRNA能够有效的促进牙髓干细胞成骨分化相关蛋白的表达,并能够有效的促进牙髓干细胞成骨分化,因此,可将其用于牙髓干细胞成骨分化促进剂。
附图说明
图1 si-LINC02192的抑制效率检测结果;
图2 转染si-LINC02192后,成骨分化蛋白ALP,RUNX2和OPN的表达变化情况;
图3 转染si-LINC02192后,细胞钙化变化情况;
图4 转染si- LINC02192后,ALP染色变化情况。
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