[发明专利]一种胶原微球吸附剂的制备方法与应用

说明书

本发明公开了一种胶原微球吸附剂的制备方法与应用，属于生物医药技术领域。本发明提供的胶原微球吸附剂，是以胶原蛋白溶液为水相，倒入分散好的油相中，加入合适的交联剂，采用反相悬浮聚合法制备的微球，然后将该微球进行清洗后，最后将胶原微球进行冷冻干燥。本发明优先选用的载体材料为胶原蛋白，具有良好的生物相容性，容易制成球状载体。载体为球形，溶胀度高，粒径在150‑1000μm，孔径分布范围为50‑900nm。在游离高胆红素浓度条件下进行吸附实验，吸附结果表明该胶原微球吸附剂对胆红素具有优异的吸附效果。本发明首次将胶原蛋白应用于高胆红素血症中胆红素的清除，为血液灌流治疗高胆红素血症提供一种新方法。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，涉及一种胶原微球吸附剂的制备方法与应用。

背景技术

胆红素(Bilirubin，BR)是胆色素的一种，是红细胞分解后产生的血红蛋白的疏水性代谢物。胆红素是非极性的脂溶性物质，难溶于水，但对血浆白蛋白具有很高的亲和力。正常人血清中的胆红素，一种是结合胆红素(或称直接胆红素)，经过肝细胞内质网作用，与葡糖醛酸或其他物质结合；另一种是游离胆红素(或称间接胆红素)，来自红细胞破坏产生的胆红素，在血浆中主要与白蛋白结合而运输。正常人血浆中的胆红素很少，当体内因内源性(血细胞缺陷或异常)或外源性因素(如中毒、急性病等)造成胆红素生成过多，或因器官组织功能受损导致胆红素的代谢障碍，可使血浆胆红素浓度异常升高，成为内源性毒素并形成高胆红素血症。其特征是在血浆浓度过高时胆红素可以透过生物膜扩散进入并沉积在组织(包括脑部)中，造成黄疸，严重的可引起组织细胞坏死危及生命。

目前临床上常用的治疗方法为光线疗法和血液净化疗法，其主要针对症状较轻的患者，特别是对于新生儿高胆红素血症，光线疗法是首选疗法。但是该方法需要较长时间才可以使血浆中胆红素水平明显下降，而对于病症较重的患者需要借助血液净化疗法。血液净化疗法包括血液置换，血液透析和血液灌流吸附法。血液置换法需要大量新鲜血浆，价格比较昂贵且来源有限，并且存在免疫反应和交叉感染的问题。血液透析对小分子量毒素具有良好的去除效果，但对于与白蛋白结合的胆红素无效。而血液灌流已被证明是从血液中清除胆红素的最有效疗法，其核心单位是吸附材料。

现有的医用胆红素吸附材料包括活性炭类、合成高分子树脂类、多糖类以及其他类型。活性炭类吸附剂(Chemical Engineering Research and Design.2010,88(8):1018-1023)尤其对小分子极性物质吸附效果较好，但对于分子量较大的胆红素分子的吸附效果欠佳，且机械强度低，易出现颗粒脱落，可导致血管栓塞等不良反应，限制了其有效应用。合成树脂中以BL-300阴离子交换树脂(Therapeutic Apheresis and Dialysis.2003,7(1):98–103)为代表，吸附率可达到50-60％。然而许多结果表明，强碱性阴离子交换树脂(American Journal of Transplantation,2010,7(9):2195-2199)虽然能高效结合胆红素，但由于其带有正电荷的吸附剂也会有效吸附抗凝剂从而导致凝血系统的紊乱。所以在肝脏支持治疗中，非离子型树脂可能比阴离子交换树脂具有更好的生物相容性(Artificial Cells NanomedicineBiotechnology,2016:1)。我国南开大学自主研制的以聚苯乙烯为骨架的大孔吸附树脂NK-110(Artificial Cells Blood SubstitutesImmobilization Biotechnology,2011,39(2):92)，可有效吸附胆红素，是目前为数不多的国产血液净化材料之一，其比表面积大，吸附效果良好，具有较好的特异吸附性能和生物相容性。多糖类吸附材料大多指以壳聚糖(中国组织工程研究与临床康复，2010,14(34):6359-6362.)、琼脂凝胶、硅胶、水凝胶、多糖类凝胶以及环糊精类等为代表的胆红素吸附剂，该类型吸附剂缺点在于吸附容量较小且机械强度较低。