[发明专利]一种裂蹄木层孔菌的miR-CM1及其应用

说明书

本发明属于生物技术和医学领域，涉及一种来自裂蹄木层孔菌的miR‑CM1的分离和鉴定，尤其涉及miR‑CM1的应用。所述miR‑CM1具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，有良好的抗衰活性。miR‑CM1可以与Mical2的3’UTR结合，调控靶基因Mical2的表达，进一步改变下游皮肤衰老标志物的表达。因此，将miR‑CM1在光老化的皮肤细胞或者组织中应用，可以抵抗紫外线辐照诱导的衰老。本发明还提供含有miR‑CM1的皮肤外用剂，且证实其具有抗衰功效。为抗衰老护肤品的开发提供新的研究方向和研发基础。

技术领域：

本发明属于生物技术和医学领域，涉及一种来自裂蹄木层孔菌的miR-CM1的分离和鉴定，尤其涉及miR-CM1的应用。

背景技术：

皮肤是人体的第一道防线，最易受到外界环境的影响而导致皮肤受损和老化。其中，诱发皮肤衰老的最重要因素就是紫外线。太阳的紫外线辐射导致皮肤老化，其特点是表皮角化不良伴异常增生，胶原减少，失去弹性，皱纹等。紫外线照射能够引起基质金属蛋白酶在光照损伤部位中表达，降解皮肤胶原蛋白。此外，紫外线可以通过活性氧介导炎症导致衰老。现代社会，随着人们对护肤重要性不断了解，对护肤知识不断增加，护肤已成为一种日常，且防晒产品已经逐渐作为人们日常使用的化妆品之一。因此，探究和开发抗衰老的护肤品的原料和机制有着较大的现实意义前景。

Mical2是一种单加氧酶，可直接结合并增强F-肌动蛋白的解聚。在缺乏肌动蛋白的情况下，它还作为NADPH氧化酶产生H₂O₂，它参与调节细胞骨架动力学和相关的基本生物学过程。Mical2还参与血管生成、囊泡转运和囊泡转运；并且与多种肿瘤的发生和发展有关。过氧化氢(H₂O₂)、紫外线等都能导致持续的活性氧(ROS)刺激，从而导致人皮肤细胞衰老。

裂蹄木层孔菌是一种典型的药用真菌，含有多糖，多酚，黄酮等化合物。越来越多的研究表明，裂蹄木层孔菌在抗肿瘤，保肝，减轻炎症反应，控制血糖等方面发挥着显著的调控作用。例如，从它身上分离的多糖可以抑制细胞中各种炎症因子的表达。此外，其水溶性提取物在特应性皮炎中发挥免疫调节作用。裂蹄木层孔菌提取物被列入已使用化妆品原料目录(2021年版)。目前，裂蹄木层孔菌提取物现已经被用于各种护肤品和化妆品的配方中。

microRNA(miRNA)是一类长度约为19-25nt的内源性非编码RNA。miRNA参与基因转录后调控，能够调节细胞和机体的生长，发育，并与人类的疾病相关。越来越多的研究表明，外源性的植物miRNAs可以调节哺乳动物靶基因的表达，实现跨界调控。例如，张辰宇发现金银花中的miR2911可以被小鼠吸收，通过靶向甲流病毒而抑制病毒复制。本申请发现裂蹄木层孔菌中的miRNA能够对人源的皮肤细胞进行跨界调节，发挥抵抗衰老的活性。这在抗衰护肤品的研发中有巨大的潜在应用价值。

发明内容：

本发明的目的是提供一种裂蹄木层孔菌的miR-CM1及其应用，其中miR-CM1可控制Mical2基因的下调表达，进一步改变下游皮肤衰老标志物的表达，在抗衰护肤品的开发和应用中有潜在的价值。

本发明提供的技术方案之一，是一种来自裂蹄木层孔菌的miRNA，具体为miR-CM1，具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列；

进一步地，所述miR-CM1的前体序列MIR-CM1，具有SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列；

进一步地，编码所述前体序列MIR-CM1的DNA，具有SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列。

本发明提供的技术方案之二，是上述miR-CM1的应用；

进一步地，所述应用是miR-CM1在调控Mical2基因表达中的应用；

更进一步地，所述Mical2基因在NCBI数据库中的Gene ID:9645；