[发明专利]一种调控HbCBL1和/或HbCIPK15表达的方法

说明书

本发明提供一种调控HbCBL1和/或HbCIPK15基因表达的方法，具体为通过割胶刺激和/或乙烯利刺激树体调控橡胶树中HbCBL1和/或HbCIPK15基因表达，本发明克隆了橡胶树HbCIPK15和HbCBL1基因的全长cDNA，首次利用酵母双杂交实验证实HbCIPK15和HbCBL1两个蛋白具有较强的互作，基因表达分析表明二者的表达明显受到乙烯利刺激和割胶的影响，说明HbCBL1‑HbCIPK15调控因子在乳管信号接收和传递方面具有重要功能，可作为橡胶树转基因育种的重要靶基因，有望通过调控该基因的表达来合理调节乳管乙烯和割胶信号传递，进而调控橡胶树胶乳再生，挖掘橡胶树最大生产潜力。

技术领域

本发明涉及基因表达技术领域，特别涉及一种调控HbCBL1和/或HbCIPK15表达的方法。

背景技术

钙离子(Ca²⁺)作为植物细胞第二信使，介导多种植物对外界刺激的应答反应，并广泛调节各种生理过程。植物细胞内Ca²⁺浓度处于不断的变化中，当遇到各种逆境信号，如高温、干旱、机械伤害、激素刺激等都会引起Ca²⁺浓度的改变，不同外界信号需要不同的Ca²⁺感受器接收并传递信号。钙结合蛋白，如钙调磷酸酶B类似蛋白(CBL)，就是植物中一种重要的Ca²⁺感受器。CBL没有激酶结构域，但它能够特异地与蛋白激酶CIPKs发生互作，进而共同调节植物的逆境胁迫应答和生长发育。CIPK蛋白由N端蛋白激酶结构域和C端调节结构域组成，CBLs通过C端与CIPKs相互作用，C端的部分区域在不同的CIPK成员之间具有保守性。

CBL-CIPKs广泛参与植物的各种胁迫应答反应。CBL和CIPK的生理作用首次在盐过度敏感(SOS)途径中被发现，在拟南芥中，SOS3(CBL4)和SOS2(CIPK24)协同作用激活拟南芥根中质膜Na⁺/H⁺逆向转运体SOS1的活性，促使高盐环境中细胞的Na⁺外流，从而增强植物的耐盐性。在拟南芥中，与CIPK24/SOS2相互作用的CBL10(SCaBP8)几乎只在芽和叶中表达并发挥作用，可能与盐向液泡的转运有关，从而控制细胞盐稳态。CBL1和CBL9都以CIPK23为互作蛋白，而CIPK23可以调节钾(K)的吸收和气孔运动。CBL2和CBL7与CIPK11相互作用，在调节质膜H⁺-ATP酶活性发面发挥不同的作用。关于CBLs和CIPKs的研究在多种植物中均有报道，如专利CN103555740A《一种小麦CBL-CIPK类抗逆调节因子及其编码基因与应用》公开了CBL-CIPK在提高小麦抗逆性中的作用、如CN108342412A《CIPK2在提高水稻抗/耐汞能力中的应用》公开了CIPK2在提高水稻抗/耐汞能力中的应用，还有水稻、毛果杨、油菜、梨等，表明了它们在逆境胁迫和植物生长发育过程中的重要作用。然而，CBL和CIPK基因在橡胶树中的研究却未见报道。

发明内容

鉴以此，本发明提出一种调控HbCBL1和/或HbCIPK15表达的方法。

本发明的技术方案是这样实现的：

一种调控HbCBL1和/或HbCIPK15表达的方法，采用割胶或乙烯利刺激调控HbCBL1和/或HbCIPK15在橡胶中表达的方法。

优选的，所述HbCBL1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

优选的，所述HbCIPK15的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

优选的，所述调控为上调或下调HbCBL1和/或HbCIPK15表达量。

优选的，所述割胶的刀次为1～9刀。

优选的，通过割胶3～9刀次，下调PR107品系的橡胶树中HbCBL1和HbCIPK15的表达量，下调热研8-79品系的橡胶树中HbCBL1的表达量。