[发明专利]一种基于纳米颗粒酶联增敏的镉离子微流控检测方法及其检测装置

权利要求书

1.一种基于纳米颗粒酶联增敏的镉离子微流控检测方法，其特征在于：其包括以下步骤，

将待测水样注入检测芯片中的待测水样存储腔(206a)；

检测芯片中的螯合剂存储腔(206b)和待测水样存储腔(206a)分别同时输出螯合剂和待测水样，待测水样和螯合剂混合反应后生成螯合物，螯合物进入检测芯片的反应腔(206w)；

依次将存储在检测芯片中的AChE-AuNPs-抗体溶液和Fe₃O₄-抗原分别挤入反应腔(206w)内，与螯合物反应；

静置2min，磁分离后，存储在检测芯片中的清水挤入反应腔(206w)，洗去上浮的清液，上浮的清液进入废液腔(206n)；

将存储在检测芯片中的Ach溶液挤入反应腔(206w)，使Ach溶液充满反应池，大量混合液被进入废液腔(206n)；

检测仪(100)检测插入反应腔(206w)内的电极组件的电压，得到电压和ph值的关系以及ph变化和镉离子浓度的关系，实现待测水样中镉离子浓度的检测。

2.如权利要求1所述的基于纳米颗粒酶联增敏的镉离子微流控检测方法，其特征在于：所述电极组件包括相互独立的工作电极(211)、参比电极(208)和对电极(210)。

3.如权利要求2所述的基于纳米颗粒酶联增敏的镉离子微流控检测方法，其特征在于：检测前制备好螯合剂、AChE-AuNPs-抗体溶液、Fe₃O₄-抗原和工作电极(211)。

4.如权利要求3所述的基于纳米颗粒酶联增敏的镉离子微流控检测方法，其特征在于：制备所述螯合剂的步骤具体为，

将10mmol/L的乙二胺四乙酸溶液以1：10的比例倒入pH为7.4的0.01mol/L HEPES缓冲溶液中，混合均匀，用作游离镉离子的螯合剂。

5.如权利要求3所述的基于纳米颗粒酶联增敏的镉离子微流控检测方法，其特征在于：制备所述AChE-AuNPs-抗体溶液的步骤具体为，

向锥形瓶中分别倒入5mL的1mol/L氯金酸溶液和195mL水。利用高速磁力搅拌加热至沸腾，在沸腾7～8min后迅速加入10g/L的柠檬酸三钠溶液4mL；

加热20min后，搅拌约10min，冷却到室温后，4℃保存备用；

取10μL的0.1mol/L碳酸钾溶液，倒入1mL上述制得的AuNPs溶液，混合均匀作为C液备用；

向抗体中加入的0.002mol/L硼酸盐缓冲溶液(pH 8.0)，稀释至6mg/L后取1mL作为D液备用；

将C液倒入D液，室温下摇床孵育50min；

向混合液中加入100μL的100g/L的BSA溶液，继续摇床孵育2h；

将混合物倒入离心管中以8000r/min离心25min；

沉淀物重悬于含有50g/L pH为8.0海藻糖的0.002mol/L硼酸盐缓冲溶液中，4℃保存备用；

取1g/L的AChE溶液20μL，倒入100μL的AuNPs-抗体溶液，混合均匀后在黑暗环境中摇床孵育2h，以7000r/min转速离心10min后弃去上清液，重复离心3次，将沉淀物重悬于100μL超纯水备用。