[发明专利]抗Inhibin-α蛋白单克隆抗体、细胞系及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及生物检测领域，提供了一种抗Inhibin‑α蛋白单克隆抗体,其重链和轻链可变区的氨基酸序列分别是SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列。发明人还提供了一株分泌抗Inhibin‑α蛋白的杂交瘤细胞系，所述细胞系为小鼠杂交瘤细胞系15E11D5E11，保藏号为：CGMCC NO.22320。抗Inhibin‑α蛋白单克隆抗体,具有高特异性、敏感性，可以特异性识别表达Inhibin‑α蛋白的细胞，适用于免疫学检测，特别是免疫组化检测。

技术领域

本发明涉及生物检测领域，特别涉及抗Inhibin-α蛋白单克隆抗体、细胞系及其制备方法和应用。

背景技术

抑制素是由下丘脑垂体性腺轴系统调控的重要激素之一。抑制素属于TGF-β家族的一员,通过降低卵泡刺激素基因的转录和下调促性腺激素释放激素受体，以旁分泌、自分泌的形式发挥局部作用，抑制腺垂体前叶基础性与受促性腺激素释放激素调节的FSH合成、分泌。同时对性腺类固醇的产生具有局部调节作用。抑制素主要包括抑制素A和抑制素B，两者均有α亚单位，区别在于β亚单位形式不同。Inhibin-α亚单位仅一种分子结构，相对分子质量为18000，位于人染色体2q33。

Inhibin-α由睾丸的Sertoli细胞和卵巢粒层细胞产生，能抑制垂体促性腺激素的产生和分泌。Inhibin-α在大多数卵巢上皮性癌中明显升高，在颗粒细胞瘤、黏液性囊腺癌中升高更加明显，且其在卵巢恶性肿瘤的早期即有较高的表达，常用于卵巢颗粒细胞瘤和癌的鉴别诊断。另外Inhibina在正常肾上腺皮质、皮质结状增生及皮质肿瘤中均表达，主要表达于皮质的网状带和束状带内层，而在皮质肿瘤中(尤其皮质腺瘤)主要呈弥漫性表达，对判断是正常或增生组织、还是肿瘤性组织具有一定帮助。

发明内容

发明人提供了一种抗Inhibin-α蛋白单克隆抗体，所述单克隆抗体重链和轻链可变区的氨基酸序列分别是SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列。

进一步地，所述单克隆抗体重链和轻链可变区氨基酸序列分别是SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5所示的核苷酸序列所编码。

进一步地，所述单克隆抗体制备过程中，免疫小鼠所用的抗原为SEQ ID NO.1所示核苷酸序列编码，经由大肠杆菌重组表达的重组蛋白。

进一步地，所述单克隆抗体特异性识别人Inhibin-α蛋白。

进一步地，所述单克隆抗体由保藏号为CGMCC NO.22320的杂交瘤细胞系产生。所述细胞系为小鼠杂交瘤细胞系15E11D5E11，分类命名为：小鼠杂交瘤细胞系，该细胞系已于2021年04月29日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。

进一步地，所述抗Inhibin-α蛋白为小鼠IgG1亚型单克隆抗体。

发明人还提供了一种抗Inhibin-α蛋白单克隆抗体的制备方法，其免疫小鼠所用的抗原为SEQ ID NO.1所示核苷酸序列编码，经由大肠杆菌重组表达的重组蛋白。

发明人还提供了一株分泌抗Inhibin-α蛋白的杂交瘤细胞系，所述细胞系为小鼠杂交瘤细胞系15E11D5E11，所述细胞系保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为：CGMCC NO.22320。

发明人还提供以上任一所述的抗Inhibin-α蛋白单克隆抗体在人Inhibin-α蛋白免疫检测中的用途。

进一步地，所述免疫检测包括免疫组织化学法，免疫印迹法和酶联免疫法。

发明人再提供了一种人Inhibin-α蛋白免疫检测试剂，所述免疫检测试剂内含有以上任一的抗Inhibin-α蛋白单克隆抗体为有效成分。