[发明专利]一种用于土壤修复的农用微生物菌剂及其制备方法

权利要求书

1.一种用于土壤修复的农用微生物菌剂，其特征在于：所述农用微生物菌剂由芽孢杆菌菌种与保护剂组成的菌悬液、与菌悬液混合的载体组成并制成固态微生物菌剂。

2.根据权利要求1所述用于土壤修复的农用微生物菌剂，其特征在于：所述芽孢杆菌菌种与保护剂的混合比例范围是100： 2-4，所述菌悬液与载体的混合比例范围是5-7：1。

3.根据权利要求1所述用于土壤修复的农用微生物菌剂的制备方法，包括以下步骤：

第一步、筛选菌种，对根际土壤中菌种筛选并鉴定获得芽孢杆菌菌株;

第二步、培养菌种，将芽孢杆菌菌株接种到培养基中培养得到芽孢杆菌菌液；

第三步、制备菌悬液，将芽孢杆菌菌液与保护剂混合制备成菌悬液；

第四步、添加载体，将菌悬液与载体按比例混合得到混合物；

第五步、真空冷冻干燥，将第四步所得混合物预先冷冻，抽真空后制得固态芽孢杆菌微生物菌剂，且所述农用微生物菌剂中芽孢杆菌有效活菌数为3.66亿/g。

4.根据权利要求3所述用于土壤修复的农用微生物菌剂的制备方法，其特征在于：所述第一步中，所述芽孢杆菌菌种自菊芋根际土壤中筛选得到，筛选步骤为取菊芋根际土壤，加入0.09%灭菌生理盐水，恒温摇床振荡培养制备土壤悬液，利用灭菌生理盐水依次10^-3-10^-5梯度稀释，充分混匀，吸取10^-3-10^-5梯度稀释液涂布至LB平板，28℃培养，挑选不同生长形态的单个典型菌落，经LB平板划线纯化，得到单个菌种，最后用80%甘油与菌种1:1混合后保存于-70℃冰箱备用。

5.根据权利要求3所述用于土壤修复的农用微生物菌剂的制备方法，其特征在于：所述第二步中，将芽孢杆菌菌种以3%的接种量接种到LB液体培养基中，调节pH为7，在30℃条件下200r/min震荡培养48h获得芽孢杆菌菌液。

6.根据权利要求3所述用于土壤修复的农用微生物菌剂的制备方法，其特征在于：所述第三步中的保护剂为4%海藻糖。

7.根据权利要求3所述用于土壤修复的农用微生物菌剂的制备方法，其特征在于：所述第四步中的载体为水稻秸秆,所述水稻秸秆经研磨，过30目筛，121℃灭菌30min，置于105℃烘箱中烘干。

8.根据权利要求7所述用于土壤修复的农用微生物菌剂的制备方法，其特征在于：所述载体与菌悬液的比例为1:5。

9.根据权利要求3所述用于土壤修复的农用微生物菌剂的制备方法，其特征在于:所述第五步中真空冷冻干燥条件为-50℃，真空50Pa。