[发明专利]一种含氨基酸复合液用于荔枝离体再生的产品及方法与应用

权利要求书

1.一种妃子笑荔枝离体再生的方法，包括下述步骤：

1）以荔枝花药为外植体，在愈伤组织诱导培养基中进行愈伤组织诱导，得到胚性愈伤组织；

2）将所述胚性愈伤组织在愈伤组织增殖培养基中进行增殖培养，得到增殖愈伤组织；

3）将步骤1）中所述胚性愈伤组织步骤2）中所述增殖愈伤组织在体胚诱导培养基中进行体胚诱导培养，得到体胚；

当愈伤组织增殖培养基为MS + 1 mg/L 2,4-D + 30 g/L蔗糖+ 7 g/L 琼脂时，体胚诱导培养基为MS + 0.1 mg/L NAA + 5 mg/L ZT + 1 mL/L 氨基酸复合液AMO2 + 0.1 g/L肌醇 + 0.4 g/L LH + 100 ml/L椰汁+ 60 g/L蔗糖 + 10 g/L琼脂；

当愈伤组织增殖培养基为MS + 1 mg/L 2,4-D + 30 g/L蔗糖+ 7 g/L 琼脂+ 4 mL/L氨基酸复合液AMO1时，体胚诱导培养基为MS + 0.1 mg/L NAA + 5 mg/L ZT + 0.1 g/L肌醇 + 0.4 g/L LH + 100 ml/L椰汁+ 60 g/L蔗糖 + 10 g/L琼脂+ 0或1 mL/L 氨基酸复合液AMO2；

当愈伤组织增殖培养基为MS + 1 mg/L 2,4-D + 30 g/L蔗糖+ 7 g/L 琼脂+ 5 mL/L氨基酸复合液AMO1时，体胚诱导培养基为MS + 0.1 mg/L NAA + 5 mg/L ZT + 0.1 g/L肌醇 + 0.4 g/L LH + 100 ml/L椰汁+ 60 g/L蔗糖 + 10 g/L琼脂；

4）将所述体胚在成熟培养基中进行成熟培养，得到成熟体胚；

5）将所述成熟体胚在萌发培养基中进行萌发培养，得到再生荔枝植株；

所述氨基酸复合液AMO1的制备方法如下：

100 mL的氨基酸复合液AMO1由如下含量的氨基酸组成：天冬氨酸的含量为0.42 g；谷氨酸的含量为0.99 g；天冬酰胺的含量为0.28 g；丝氨酸的含量为0.48 g；谷氨酰胺的含量为2.18 g；甘氨酸的含量为0.14 g；组氨酸的含量为0.27 g；γ-氨基丁酸的含量为4.35 g；精氨酸的含量为2.54 g；苏氨酸的含量为0.36 g；丙氨酸的含量为2.67 g；脯氨酸的含量为1.48 g；酪氨酸的含量为0.22 g；缬氨酸的含量为0.53 g；甲硫氨酸的含量为0.08 g；胱氨酸的含量为0.17 g；异亮氨酸的含量为0.59 g；亮氨酸的含量为1.11 g；苯丙氨酸的含量为0.66 g；色氨酸的含量为0.14 g；赖氨酸的含量为0.35 g；

所述氨基酸复合液AMO2的制备方法如下：

100 mL的氨基酸复合液AMO2由如下含量的氨基酸组成：天冬氨酸的含量为0.31 g；谷氨酸的含量为0.68 g；天冬酰胺的含量为0.21 g；丝氨酸的含量为0.37 g；谷氨酰胺的含量为2.40 g；甘氨酸的含量为0.12 g；组氨酸的含量为0.38 g；γ-氨基丁酸的含量为4.44 g；精氨酸的含量为3.00 g；苏氨酸的含量为0.31 g；丙氨酸的含量为2.26 g；脯氨酸的含量为1.22 g；酪氨酸的含量为0.17 g；缬氨酸的含量为0.88 g；甲硫氨酸的含量为0.06 g；胱氨酸的含量为0.14 g；异亮氨酸的含量为0.42 g；亮氨酸的含量为1.42 g；苯丙氨酸的含量为0.57 g；色氨酸的含量为0.16 g；赖氨酸的含量为0.49 g。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述愈伤组织诱导培养基为MS + 3 mg/L2,4-D + 0.5 mg/L 6-BA + 0.5 mg/L NAA + 0.4 g/L LH + 30 g/L蔗糖 + 7 g/L琼脂；

所述成熟培养基为MS + 0.5 mg/L IAA + 1 mg/L ABA + 100 ml/L椰汁 + 60 g/L蔗糖 + 10 g/L琼脂；

所述萌发培养基为MS + 1 mg/L GA₃ + 30 g/L蔗糖 + 7 g/L琼脂。