[发明专利]杏鲍菇子实体制备甲壳素/葡聚糖复合止血海绵的方法

说明书

本发明涉及杏鲍菇子实体制备的甲壳素/葡聚糖复合止血海绵的方法。本发明技术方案是：将杏鲍菇子实体浸泡于氢氧化钠水溶液中进行脱蛋白反应得到脱蛋白杏鲍菇子实体；将脱蛋白杏鲍菇子实体进行水洗至中性，冷冻干燥，之后浸泡于NaClO溶液中进行TEMPO氧化处理，洗至中性后，进行第二次冷冻干燥；将第二次冷冻干燥后海绵状脱蛋白杏鲍菇子实体浸泡于CaCl₂溶液中进行交联反应，而后洗去未交联的钙离子，冷冻干燥，得到甲壳素/葡聚糖复合止血海绵。本发明制备的复合止血海绵可快速形成血栓达到快速止血效果，制备方法简单，反应温和、能耗低、环境友好，原料成本低廉，简单易得。

技术领域

本发明属于医用高分子材料领域，具体涉及一种杏鲍菇子实体制备的甲壳素/葡聚糖复合止血海绵的方法。该海绵原料纯天然、具有生物相容性好、生物可降解性以及高效止血性能。

技术背景

不可控出血是在战场上、平民事故中、手术室中创伤死亡的主要因素。据报道，近三分之一的创伤死亡是由于大出血导致的，其中近50 %的死亡是发生在紧急医疗人员到达之前。因此，对于危及生命的外伤性出血，需要及时有效的止血。到目前为止，随着针对止血的研究不断推进，已经有一系列的止血材料，如止血带、明胶海绵、纱布、粉剂、纤维蛋白绷带、氧化再生纤维素和纤维蛋白胶等等，其中有一些止血材料已经被商业化，包括Celox^TM,HemCon^®，Tramadex^®，QuikClot^®等，但它们各自有一定的不足之处：常用的止血带和绷带无法对穿刺伤口（子弹、炸弹和炸药造成的、交通事故造成的或日常生活中造成的不规则且深窄的、不可压缩的伤口）进行及时的止血；明胶和胶原所使用的血纤维蛋白源自血液，可能会导致病毒感染；多孔沸石在吸收血液中的水分后会放出大量的热，容易导致伤口炎症。因此，制备一种能够对不规则形状的深部伤口进行高效止血的材料具有重要的意义。

甲壳素是一种天然高分子多糖，在天然储量上仅次于纤维素。由于它成本低廉，来源丰富，且具有良好的生物相容性和生物降解性，促使其在生物止血领域有广阔的应用前景。传统制备甲壳素多孔止血海绵通过溶解/再生技术，制备过程不仅繁琐、复杂，而且需要引入有毒的化学交联剂。与传统方法不同，本发明直接利用杏鲍菇子实体天然的三维网络结构，通过原位刻蚀去除蛋白质和部分多糖而保留以甲壳素/葡聚糖为主的骨架，构筑多孔止血海绵， 可有效避免使用有毒的化学交联剂。迄今为止，这种直接从天然菌类子实体入手制备甲壳素多孔止血海绵的方法尚未见报道。

发明内容

为了克服上述止血材料不能用应于深而狭窄的、不可按压的出血的技术问题，并制备无需任何交联剂、可降解且使用于不可按压伤口的高效止血海绵，本发明提供一种直接利用杏鲍菇子实体制备的甲壳素/葡聚糖复合多孔止血海绵的方法。本发明独创性地直接对杏鲍菇子实体制备多孔血海绵，仅通过简单的脱蛋白处理、表面氧化与钙离子的引入，即可得到无需任何化学交联剂的止血海绵。在脱蛋白过程中去除蛋白质、油脂与可溶性多糖等，得到所需的甲壳素/葡聚糖骨架，在TEMPO氧化过程中通过“造孔”与亲水基团的引入赋予海绵优异的血触变能力，最后通过钙离子的引入改善TEMPO氧化后海绵的压缩性能，确保其能在止血中对伤口进行有效的物理封堵。

本发明是通过以下技术方案实现的：

1、将杏鲍菇子实体浸泡于氢氧化钠水溶液中进行脱蛋白反应，得到海绵状脱蛋白杏鲍菇子实体；

2、将海绵状脱蛋白杏鲍菇子实体进行水洗至中性，除去杏鲍菇子实体中的水溶性多糖，冷冻干燥；

3、将冷冻干燥的海绵浸泡于NaClO溶液中进行TEMPO 氧化处理，氧化处理后的海绵洗至中性，进行第二次冷冻干燥；

4、将第二次冷冻干燥后海绵状脱蛋白杏鲍菇子实体浸泡于 CaCl₂ 溶液中进行交联反应，而后洗去未交联的钙离子，冷冻干燥，得到甲壳素/葡聚糖复合止血海绵。