[发明专利]新的芽孢杆菌菌株及其应用

说明书

本发明提供了一种新的芽孢杆菌菌株(Bacillus sp.)Ya‑1(于2021年9月6日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，生物保藏号CGMCC No.23360)，所述菌株的发酵液对农业生产发生严重的生姜青枯病、辣椒枯萎病和瓜类枯萎病等植物病原菌具有显著的拮抗作用，抑菌谱广。

技术领域

本发明涉及植物枯萎病防治领域，具体而言，涉及一种防治辣椒枯萎病的芽孢杆菌菌株Ya-1及其应用。

背景技术

枯萎病作为一种常见的植物病害已成为制约经济作物发展的一大主要病害，特别是对生姜、黄瓜、番茄、茄子、香蕉等作物造成了巨大经济损失，这些年随产业化集中，辣椒等蔬菜复种指数的提高，枯萎病的发生呈逐年增长趋势，严重影响了我国辣椒质量以及农户的收入。

辣椒枯萎病是由尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)侵染引起，其最为常见表现的是辣椒开花结果期叶片发黄，严重时伴随有大量脱落，部分临近地面的茎叶易受到田间积水的影响，长期处于腐烂状态，甚至影响到上部茎叶，使其凋萎。地下根系生长异常，存在软腐的问题，通过对茎基部的纵面剖析可以发现，其中的维管束普遍转变为褐色，若现场湿度较大，病部还伴随有霉状物，严重影响作物生长。辣椒枯萎病在世界上许多国家均有发生。我国自1955年首次报道(俞大绂，1955)，随后，在陕西、甘肃、湖南、湖北、北京、广东、广西、海南等地相继发生(李静等，2014)。发病率一般为15％～30％，严重时为50％以上，个别地区严重时高达70％～80％，甚至绝产，造成了巨大经济损失。

为了解决辣椒枯萎病的问题，在实际生产中，培育和选用抗枯萎病品种从根本上解决辣椒枯萎病病害的重要措施，然而至今仍未有合适的抗枯萎病的优良品种，在大田种植过程中，枯萎病仍然普遍发生。由于辣椒枯萎病属典型的土传病害，病菌以厚垣孢子在土壤及病残体中越冬，可以在土壤中存活数年，并且很多宿主不会表现出症状，感病品种的重复种植能够导致厚垣孢子在土壤中大量积累，因而防治难度更大。

目前国内外关于枯萎病的防治方法主要是通过化学防治，例如选用恶霉灵、甲基托布津、代森锰锌、氟硅唑、吡唑醚菌酯和氰烯菌酯等化学杀菌剂进行灌根防治，然而不同化学杀菌剂对于不同种类、品种的农作物的防治效果不一致，且长期大量使用这些化学药剂，病菌易产生抗药性，防治效果逐年降低，甚至达到无法控制的程度，同时污染环境、破坏生态平衡和农药残留等问题也日益凸显。因此化学防治已经不能作为最合适的手段，需要更安全环保的生物防治剂代替这些化学药剂。

然而，由于单一菌株的局限性和致病菌的同步进化、现有生物菌株生防机制单一等原因，目前尚未发现能够有效拮抗枯萎病且抗菌谱广的生物菌株制剂。

发明内容

基于上述现有技术中存在的问题，本发明提供一株能够从多种机制途径同时发挥作用、协同增效，有效防治多种植物枯萎病的芽孢杆菌(Bacillus sp.)菌株Ya-1。

本发明提供的芽孢杆菌Bacillus sp.菌株Ya-1，其特征在于，保藏号为CGMCCNo.23360。

进一步地，本发明所提供的芽孢杆菌Bacillus sp.菌株Ya-1，其16S rDNA序列如SEQ ID 1所示。

本发明进一步提供上述芽孢杆菌Bacillus sp.菌株Ya-1在植物枯萎病防治中的应用。

进一步的，本发明提供芽孢杆菌Bacillus sp.菌株Ya-1的菌体在植物枯萎病防治中的应用。

优选地，所述菌体的制备方法为：从4℃冰箱中取出，接种于LB液体培养基(LB液体培养基配方为：10g氯化钠，10g蛋白胨，5g酵母粉，1000mL蒸馏水，充分溶解后分装于250mL三角瓶中，每瓶200mL液体LB，121℃灭菌30min，冷却，备用。)中，31℃,200rpm摇床中培养24h后，所得的菌悬体即为活菌体。