[发明专利]一种酶法制备n-3多不饱和脂肪酸甘油酯的方法

说明书

本发明公开了一种酶法制备n‑3多不饱和脂肪酸甘油酯的方法，属于油脂加工技术领域。本发明首次利用吸附的方法降低反应底物n‑3多不饱和脂肪酸非甘油酯的过氧化值等杂质，以达到降低这些杂质在酶促反应过程中对脂肪酶活性影响的目的，从而提高酶促酯酯交换过程中脂肪酶的催化效率，降低酶法制备n‑3多不饱和脂肪酸甘油酯的成本。本发明提供了一种提高酶法合成n‑3多不饱和脂肪酸甘油酯效率和得率的方法，避免了脂肪酶酶活在反应过程中容易失活的问题，本发明所采用的新颖方法在结构脂的酶促制备中具有极大的应用前景。

技术领域

本发明属于油脂加工技术领域，具体涉及一种酶法制备n-3多不饱和脂肪酸甘油酯的方法。

背景技术

n-3多不饱和脂肪酸(n-3PUFA)是第一个不饱和双键出现在碳链甲基端第三和第四个碳原子之间的多不饱和脂肪酸。n-3PUFA不仅是生物体脂质的重要组成部分，同时还因其特殊的双键结构在生物体内发挥着重要的生理活性功能。

n-3PUFA在人体内有着十分重要的生理活性功能和保健功能，对于人体的新陈代谢起着重要的调节作用。例如，EPA(二十碳五烯酸，Eicosapentaenoic Acid)主要起到防治心脑血管疾病和炎症的作用。EPA能通过抑制血小板凝聚、增加血小板细胞膜流动性来减少血栓素形成，因而具有预防心肌梗塞和脑梗塞的功能；EPA具有降血脂和胆固醇的功能，能够预防和治疗粥动脉硬化；EPA具有抗炎的功能，可以抑制过敏反应。DHA(二十二碳六烯酸，Docosahexaenoic Acid)可增强神经系统功能，在保护视力、预防老年痴呆、促进婴幼儿大脑发育和抑制肿瘤方面的效果比较好。DHA是视网膜的主要组成部分(占40-50％)，可防止视力下降，活化衰弱的视网膜细胞；是人脑的主要组成物质(占人脑脂肪10％)，能促进脑细胞生长发育，一定程度上预防、治疗老年痴呆症，添加于婴幼儿配方食品中可促进智力发育，改善大脑机能；DHA能抑制癌细胞的生长转移，降低肿瘤生长速度。

n-3PUFA的存在形式主要有三种：甘油酯型、乙酯型和游离脂肪酸型。有研究指出，胰脂酶水解乙酯中酯键的速率比水解甘油酯中酯键的速率低10～50倍，因而乙酯在体内消化吸收比较困难；同时乙酯型n-3PUFA在体内水解后会产生乙醇，存在一定的安全隐患。游离型n-3PUFA消化吸收快，但是容易氧化生成有害物质，同时产生酸味，不易被消费者接受。相比于乙酯型和游离脂肪酸型，甘油酯型不仅易被人体消化吸收、氧化稳定性好，而且作为n-3PUFA的天然存在形式，消费者接受程度高，因而制备高纯度的甘油酯型n-3PUFA是未来研究的重点，开发一种绿色高效的新型方法富集n-3PUFA甘油酯具有重要的现实意义。

目前，n-3多不饱和脂肪酸甘油酯的制备方法包括甘油和n-3游离脂肪酸乙酯或者甲酯的直接酯化法和富含n-3多不饱和脂肪酸油脂的部分水解法。前一种方法通过事先对n-3多不饱和脂肪酸甲酯或者乙酯进行纯化，得到高含量的n-3多不饱和脂肪酸非甘油酯，因此可以得到n-3多不饱和脂肪酸含量更高的甘油酯产品，但制约酶法制备n-3多不饱和脂肪酸甘油酯产业化应用中的主要障碍为脂肪酶价格非常昂贵，如果反应体系中的杂质对脂肪酶的酶活影响大的话，会造成脂肪酶重复使用次数少和催化效率降低，生产成本相应的也很高。

发明内容

[技术问题]

酶法制备n-3多不饱和脂肪酸甘油酯的原料n-3多不饱和脂肪酸甲酯或者乙酯(非甘油酯)由于含有多个双键，容易氧化，产生较多的过氧化物等杂质，这些氧化产物等杂质的存在可能影响了脂肪酶的催化效果，造成n-3多不饱和脂肪酸甘油酯的制备成本增加。

[技术方案]

本发明对所采用的n-3多不饱和脂肪酸非甘油酯底物进行降过氧化值处理，然后使用酶法酯酯交换的方法制备n-3多不饱和脂肪酸甘油酯，这种酶法制备工艺路线显著增加了脂肪酶的重复使用次数，降低了规模化制备的成本，具有广阔的市场应用前景。

具体的，本发明提供了如下技术方案：一种酶法制备n-3多不饱和脂肪酸甘油酯的方法，所述方法包括以下步骤：