[发明专利]一种对新冠变异株广谱中和保护的免疫原及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种载体，其包含编码Spike蛋白的突变体的核苷酸序列；所述Spike蛋白的突变体，其在对应于野生的新型冠状病毒的Spike蛋白的第614位、第484位和第501位的位点上包含突变；

优选地，所述野生的新型冠状病毒的Spike蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示；

优选地，所述Spike蛋白的突变体包含下述突变：在对应于SEQ ID NO：1的第614位的位置上的氨基酸被突变为甘氨酸；在对应于SEQ ID NO：1的第484位的位置上的氨基酸被突变为赖氨酸；以及，在对应于SEQ ID NO：1的第501位的位置上的氨基酸被突变为酪氨酸；

优选地，所述Spike蛋白的突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示；

优选地，所述载体选自质粒(例如，PCDNA3.1)，噬菌粒，柯斯质粒，人工染色体，噬菌体或病毒载体；

优选地，所述载体用于表达(例如在受试者(例如哺乳动物，例如人)体内表达)所述Spike蛋白的突变体；

优选地，所述载体是用于基因治疗的载体，例如质粒，腺病毒载体，腺相关病毒载体，和慢病毒载体。

2.一种核酸分子，其具有权利要求1的载体所包含的编码Spike蛋白的突变体的核苷酸序列。

3.一种Spike蛋白的突变体，其如权1中所述，所述Spike蛋白的突变体，其在对应于野生的新型冠状病毒的Spike蛋白的第614位、第484位和第501位的位点上包含突变；

优选地，所述野生的新型冠状病毒的Spike蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示；

优选地，所述Spike蛋白的突变体包含下述突变：在对应于SEQ ID NO：1的第614位的位置上的氨基酸被突变为甘氨酸；在对应于SEQ ID NO：1的第484位的位置上的氨基酸被突变为赖氨酸；以及，在对应于SEQ ID NO：1的第501位的位置上的氨基酸被突变为酪氨酸；

优选地，所述Spike蛋白的突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。

4.一种宿主细胞，其包含权利要求2所述的核酸分子或权利要求1所述的载体；

优选地，所述宿主细胞选自原核细胞(例如，大肠杆菌细胞)，以及真核细胞(例如，酵母细胞)，昆虫细胞，植物细胞和动物细胞(例如，哺乳动物细胞，例如，小鼠细胞、人细胞等)；

优选地，所述宿主细胞是大肠杆菌细胞，例如大肠杆菌DH5α细胞；或者所述宿主细胞是人细胞(例如，293T细胞)。

5.一种假性化病毒样颗粒，其包含Spike蛋白的突变体；所述Spike蛋白的突变体，其在对应于野生的新型冠状病毒的Spike蛋白的第614位、第484位和第501位的位点上包含突变；

优选地，所述野生的新型冠状病毒的Spike蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示；

优选地，所述Spike蛋白的突变体包含下述突变：在对应于SEQ ID NO：1的第614位的位置上的氨基酸被突变为甘氨酸；在对应于SEQ ID NO：1的第484位的位置上的氨基酸被突变为赖氨酸；以及，在对应于SEQ ID NO：1的第501位的位置上的氨基酸被突变为酪氨酸；

优选地，所述Spike蛋白的突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示；

优选地，所述假性化病毒样颗粒具有包含所述S蛋白的突变体的包膜蛋白；

优选地，所述类病毒颗粒还包含VSV病毒或HIV病毒的核酸(例如，基因组)。

6.一种药物组合物，其包含药学上可接受的载体、稀释剂、或赋形剂，以及选自下述中的一项或多项：

(1)权利要求3的Spike蛋白的突变体；

(2)权利要求2的核酸分子；

(3)权利要求1的载体；

(4)权利要求4的宿主细胞；和，

(5)权利要求5的假型化病毒样颗粒；

优选地，所述药物组合物通过注射进行施用；

优选地，所述药物组合物的形式为注射液或冻干粉剂；

任选地，所述药物组合物还包含另外的药学活性剂，例如另外的抗病毒剂(例如干扰素、洛匹那韦、利托那韦、磷酸氯喹、法匹拉韦、瑞德西韦等)。