[发明专利]一种细胞靶向分子探针的筛选方法及其应用

说明书

本发明公开了一种细胞靶向分子探针的筛选方法及其应用。属于生物医药技术领域，具体步骤如下：1、先将分子探针置于孔板中进行包被；2、再将待筛选细胞加入孔板中与包被后的分子探针进行孵育结合；3、洗去未结合的细胞，保留结合的细胞，最后对结合的细胞数量进行量化分析，最终筛选出细胞靶向分子探针。本发明所述的一种的细胞靶向分子探针的筛选方法，能够筛选体外诊断分子探针、活体成像分子探针，有助于癌症、自身免疫性疾病等，具有快速、经济、高效、精准等特点，在助力疾病诊断和治疗方面有着重要的价值。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，涉及一种细胞靶向分子探针的筛选方法及其应用。

背景技术

分子探针是指能精准反映生物医学问题的功能性物质。分子探针是实现分子成像的先决条件和核心技术。分子影像技术的发展除了需要先进的成像设备外，还需要发展新型而高效的分子探针。分子探针种类繁多，根据成像设备的不同，分子探针分为光学、核医学、磁学、声学、光声等不同种类。

细胞表面除细胞膜外具有大量的抗原、受体、糖类化合物、跨膜蛋白等具有特殊结构和功能的化合物。利用其不同细胞表面特殊的分子结构设计和开发靶向性分子探针对疾病的诊断和治疗有着极为重要的研究价值和社会价值。

因此，开发细胞靶向分子探针的筛选方法，对快速准确获得特定细胞的靶向分子探针有着极为重要的意义。

发明内容

发明目的：本发明的目的是提供了一种细胞靶向分子探针的筛选方法及其应用。

技术方案：在本发明的第一方面，本发明提供了一种细胞靶向分子探针的筛选方法。其具体筛选步骤如下：

(1)、先将分子探针置于孔板中进行包被；

(2)、再将待筛选细胞加入孔板中与包被后的分子探针进行孵育结合；

(3)、洗去未结合的细胞，保留结合的细胞，最后对结合的细胞数量进行量化分析，最终筛选出细胞靶向分子探针。

进一步的，在步骤(1)中，所述分子探针包括小分子、多肽、抗体及蛋白；

所述孔板包括6孔板、12孔板、24孔板、48孔板、96孔板及384孔板。

进一步的，在步骤(1)中，所述包被的方式包括在缓冲液中直接进行包被、利用生物素和链霉素连接进行包被、利用分子探针与孔板表面官能团进行共价连接。

进一步的，所述缓冲液包括PBS缓冲液、Tris缓冲液、HEPES缓冲液、MES缓冲液、Citrate缓冲液、MOPS缓冲液及醋酸钠缓冲液；其浓度是：1mM-1M。

进一步的，在步骤(2)中，所述待筛选细胞包括肿瘤细胞、干细胞、T细胞、B细胞、DC细胞、巨噬细胞及红细胞。

进一步的，在步骤(2)中，所述分子探针与待筛选细胞的结合方式包括分子探针与细胞自身的靶标分子相结合和分子探针与细胞被基因转导获得的外源靶标分子相结合；

其孵育结合的时间为1min-24h；温度为0-40℃。

进一步的，所述靶标分子包括抗原分子、受体分子、跨膜蛋白、糖类化合物及其他蛋白质。

进一步的，在步骤(3)中，所述细胞量化分析方法具体包括显微镜照相后计数、细胞显色液进行显色后读取特征波长吸光值、细胞荧光染色后读取荧光值、细胞摄入生物发光底物后读取发光值及细胞放射性标记后读取伽马计数。

进一步的，作为本发明的另一个方面，本发明提供所述的细胞靶向分子探针(多肽分子探针)的筛选方法应用于筛选体外诊断分子探针及活体成像分子探针方面的用途。

进一步的，所述筛选方法筛选的细胞靶向分子探针应用于PET、SPECT、CT、MR、US及光学成像等方面的用途。