[发明专利]免疫细胞体外诱导扩增以及保存方法

权利要求书

1.免疫细胞体外诱导扩增以及保存方法，其特征在于：该方法包含以下操作步骤：

S1、利用免疫抗体在在培养皿中贴壁培养，获取抗体包被培养皿；

S2、刺激免疫细胞，从而激活专用培养基，分离制取单个细胞核，并且容置于上述包被培养皿中，培养后制取免疫细胞；

S3、利用免疫细胞扩增培养基将上述单个核细胞进行一次扩增培养，得到诱导扩增的免疫细胞；

S4、利用免疫细胞专用诱导培养基将一次扩增的免疫细胞进行分化培养，获取分化后的免疫细胞；

S5、利用免疫细胞激活培养基将分化后的一次扩增免疫细胞进行二次激活和扩增培养，获得二次免疫细胞；

S6、利用免疫细胞冻存液冻存免疫细胞，得到冻存的二次免疫细胞；将冻存的二次免疫细胞置于恒温的水浴装置(10)中融化，并与一次免疫细胞的冷冻复苏液混合，得到复苏细胞混合液；

S7、将复苏细胞混合液进行离心处理，得到复苏的免疫细胞。

2.根据权利要求1所述的免疫细胞体外诱导扩增以及保存方法，其特征在于：所述冷冻复苏液包含HAS、右旋糖酐40、FBS，以DMEM/F12培养基为基础培养基。

3.根据权利要求1所述的免疫细胞体外诱导扩增以及保存方法，其特征在于：所述免疫细胞扩增培养基由200U/mL的IL-1、350U/mL的IL-2和0.01KE/mL吡柔比新构成，以OpTmizerTMCTSTM无血清培养基为基础培养基。

4.根据权利要求1所述的免疫细胞体外诱导扩增以及保存方法，其特征在于：所述免疫细胞冻存液由DMSO、FBS、HAS+、0.001g/mL的白酒草皂苷R构成，以DMEM/F12培养基为基础培养基。

5.根据权利要求1所述的免疫细胞体外诱导扩增以及保存方法，其特征在于：所述水浴装置(10)包括水浴箱(12)，所述水浴箱(12)内部开设有保温室(11)，所述保温室(11)靠近内壁一侧设置有用于供热的电热丝(13)，所述保温室(11)的内部收容有培养皿(40)，所述保温室(11)的内部容纳有容纳腔体(30)，用于盛放培养皿(40)；所述水浴装置(10)的底端设置有驱动组件(20)，所述驱动组件(20)的顶端延伸入保温室(11)的内部，用于对驱动容纳腔体(30)沿着保温室(11)的内部轴向升降。

6.根据权利要求5所述的免疫细胞体外诱导扩增以及保存方法，其特征在于：所述容纳腔体(30)的内底面设置有固定座(31)，所述固定座(31)的表面卡接有若干个培养皿(40)，若干个所述培养皿(40)呈阵列分布，所述固定座(31)的顶面开设有用于容纳培养皿(40)的固定槽(34)，所述固定槽(34)的内壁开设有安装槽(32)，所述安装槽(32)内部固定有橡胶条(33)，所述橡胶条(33)远离固定座(31)的一侧抵住培养皿(40)的表面。

7.根据权利要求6所述的免疫细胞体外诱导扩增以及保存方法，其特征在于：所述容纳腔体(30)的底端固定连接有抬升座(35)，所述抬升座(35)与保温室(11)的内底面之间设置有若干个具有弹性伸缩功能的限位组件(50)，若干个所述限位组件(50)沿着保温室(11)的内底面呈阵列分布。

8.根据权利要求7所述的免疫细胞体外诱导扩增以及保存方法，其特征在于：所述限位组件(50)包括固定连接保温室(11)内底面的延伸管(53)，所述延伸管(53)的内部容纳有拉伸弹簧(51)，所述拉伸弹簧(51)的顶端固定有连接杆(52)，所述连接杆(52)的顶端与抬升座(35)的底面固定连接，所述连接杆(52)的底端外侧阵列分布有限位滑块(54)，所述延伸管(53)相对于限位滑块(54)的内壁开设有限位滑槽(55)，所述限位滑块(54)沿着限位滑槽(55)的内部滑动。