[发明专利]一种基于唾液特异性岩藻糖基化结构糖谱及其检测方法和应用

说明书

本发明公开了一种基于唾液特异性岩藻糖基化结构糖谱及其检测方法，首先采集人体唾液标本，接着从唾液中提取蛋白质，然后将聚糖从糖蛋白质上酶解富集，再用质谱对聚糖结构解析和丰度定量分析，最后确定样本中聚糖糖谱。通过对健康、非癌症和肺癌唾液分析，鉴定高丰度核心岩藻糖和支链岩藻糖的糖谱，可应用于肺癌的临床筛查。本方案便于早期诊断，样本易收集，对患者无伤害，具有优良的应用前景，对高发病率和高死亡率肺癌的早期筛查和治疗等方面有着重要意义。

技术领域

本发明属于生物分子分析试剂技术领域，具体涉及一种基于唾液特异性岩藻糖基化结构糖谱及其检测方法和应用。

背景技术

过去半个世纪以来科技和技术的进步对患者的确诊有了极大的提高，癌症患者的生存率也翻了一番。然而作为头号杀手的肺癌，发病率和死亡率仍然居高不下。如果肿瘤仍局限于局部(肺内)或处于早期，患者的五年生存率超过56-60％。遗憾的是目前的技术手段，只有不到16％的肺癌病例能够成功早期诊断；绝大多数确诊病例，肺癌细胞已扩散到其他器官，其五年生存率不足5％。早期诊断出患有癌症的患者极有可能获得治愈性治疗和长期生存：例如，在第一阶段被诊断出的肺癌患者中，有57％的病人可以生存5年或更长时间，而在第四阶段中只有3％的病人可以存活。因此，针对早期诊断的肺癌肿瘤的开发有着极其重要的健康和经济意义。血液中的DNA、RNA、蛋白质、代谢物和微生物群等分子也可能存在于唾液中。因此这些分子浓度变化可用作生物标志物来检测早期癌症或监测对治疗管理的反应。研究表明，即使在症状出现之前，简单的唾液测试也可以在最早阶段检测出口腔和喉咙的疾病。这类测试在唾液中寻找明显的遗传差异，在检测口腔癌方面的准确率超过90％。将乳腺癌患者与对照组进行比较时，唾液中蛋白质CA15-3的浓度水平可能呈正相关。最近的其他研究发现，唾液可用于以前所未有的准确度检测肺癌患者是否具有肺癌相关突变。然而，对于唾液蛋白的聚糖分析是否可靠且稳健诊断肺癌的方法尚无报道。

因此，有必要研发一种基于唾液特异性岩藻糖基化结构糖谱及其检测方法和应用解决上述问题。

发明内容

本发明目的是提供一种基于唾液特异性岩藻糖基化结构糖谱及其检测方法和应用。

本发明的一种技术方案是：

一种基于唾液特异性岩藻糖基化结构糖谱，包括如下通式结构：

其中，

F为岩藻糖；

G为半乳糖；

M为甘露糖；

N为乙酰氨基葡糖；

α1,2代表G单糖的碳2与F单糖的碳1连接；

α1,3代表N单糖的碳3与F单糖的碳1连接；

α1,6代表N单糖的碳6与F单糖的碳1连接。

本发明的另一技术方案是：

一种基于唾液特异性岩藻糖基化结构糖谱的检测方法，包括步骤：

1)从蛋白质中提取聚糖；

2)确定聚糖岩藻糖链接的方法；

3)唾液特异性岩藻糖基化结构糖谱的检测。

进一步的，步骤1)中，所述从蛋白质中提取聚糖包括：

(1)填充移液管制备：

将微米级多孔筛板加入空心移液管；

将表面修饰有醛基的纳米级多孔微米球形树脂填充到空心移液管，填充后空心移液管称为填充移液管；

将另一个微米级多孔筛板加入至所述填充移液管中，将醛基树脂固定于所述填充移液管中；