[发明专利]用于抑制PRR14基因的siRNA分子

说明书

本发明公开了一种用于抑制PRR14基因的siRNA分子，由正义链SEQ ID NO:1和反义链SEQ ID NO:2组成。本发明的siRNA分子可用于制备治疗皮肤鳞状细胞癌的药物。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种用于抑制PRR14基因的siRNA分子及其在制备抗肿瘤药物中的用途。

背景技术

人皮肤鳞状细胞癌(cutaneous squamous cell carcinoma，cSCC)起源于表皮或附属器角质形成细胞，是具有侵袭性和潜在恶性的皮肤肿瘤，占恶性上皮性肿瘤的15％，占非黑色素皮肤肿瘤的20％，仅此于基底细胞癌。cSCC发病因素复杂，可能与紫外线照射、某些化学品的接触、癌前期皮肤病、外伤、瘢痕和免疫抑制剂的应用有关，但其具体发病机制尚不清楚。在大多数情况下，cSCC很容易通过单纯切除或放射治疗达到治愈，然而，局部晚期肿瘤也可出现局部复发，淋巴结或远处转移。常规采用手术、激光、冷冻、放疗等治疗方法，但存在组织结构破坏性大、易复发、复发后再次治疗困难等问题。因此，研究皮肤癌发生机制、治疗手段和预防复发及转移是目前皮肤科领域亟需解决的关键。

富含脯氨酸的蛋白质14(Proline-rich protein 14，PRR14)是富含脯氨酸蛋白质家族的一个成员，该家族包含一个富含脯氨酸的区域，两侧有N端和C端的核定位信号，富含脯氨酸的区域通常通过与各种结构域(尤其是SH3结构域)的结合而参与到多种信号通路。PRR14被认为是核纤层的一个新组成部分，在细胞周期中将异染色质拴在核纤层上，在细胞周期过程中具有特异性和定位异染色质的能力。PRR14很可能是肿瘤发生过程中介导核形态改变及其功能改变的共同机制中的一个关键分子。有报道指出，PRR14在非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer，NSCLC)患者的肿瘤组织中异常过表达，并与预后不良相关，通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路促进肺癌细胞增殖。PRR14作为一种富含脯氨酸的蛋白质，与GRB2的Src同源3(Src homology 3，SH3)结构域结合，导致PI3K活化，可能是一种新的PI3K通路激活剂，促进了肺癌的发生。结果提示，PRR14可作为一个独立的预后指标，在NSCLC的治疗中可能成为一个潜在的治疗靶点。还有研究指出，PRR14 在结肠癌组织细胞中也呈高表达，其高表达水平与肿瘤大小、远处转移及淋巴结转移分期有关。功能研究显示抑制PRR14的表达可以抑制结肠癌细胞的生长、迁移和侵袭。此外， PRR14的敲除抑制了上皮-间充质转化(EMT)过程、细胞周期相关蛋白的表达和p-AKT 水平。最新研究发现，PRR14在乳腺癌中过度表达，参与乳腺癌的发生，PRR14表达增加促进乳腺癌细胞增殖和肿瘤形成。PRR14在乳腺癌中通过激活PI3K/Akt/mTOR途径和抑制CHEK2途径来保护细胞免受凋亡和刺激增殖。

RNA干扰(RNA interference，RNAi)是指在进化过程中高度保守、由双链RNA(double-stranded RNA，dsRNA)诱发的、同源信使RNA(message RNA，mRNA)高效特异性降解的基因转录后沉默现象。近年来，RNAi作为一个基因治疗技术，得到了迅速发展，尤其在抗病毒、抗肿瘤和抗炎症等医药领域显示出广阔的应用前景，已经部分RNAi 药物已进入临床试验阶段。小干扰核酸(small interfering RNA，siRNA)是RNAi的效应分子，由两条互补的RNA单链构成，长21～23个核苷酸(nt)。由于RNAi技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表达，所以技术广泛地应用于功能基因组学研究、传染性疾病以及抗病毒、抗肿瘤治疗的研究中。自从2016年12月23日美国食品和药物管理局FDA批准了首个用于治疗脊髓性肌萎缩的RNAi药物Spinraza(Nusinersen)的上市以来，国际上已有数十种RNAi药物进入临床阶段。

发明内容