[发明专利]一种白及多糖物质及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种白及多糖物质的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：用低元醇对白及鳞茎进行回流提取去除小分子物质，将回流提取液经固液分离后得到的固相物与复合酶和水共同酶解提取，将酶解提取液经固液分离后得到的液相物进行第一次醇沉，收集第一次醇沉后的沉淀；

除去所述沉淀中的蛋白质，随后进行第二次醇沉，收集第二次醇沉后的沉淀，复溶，第一次透析，收集截留于透析装置内的物质，得到白及粗多糖。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，回流提取过程中，所述低元醇与所述白及鳞茎的料液比为1g：8-12mL，所述低元醇的浓度为92-98vt％；

优选地，所述低元醇为乙醇；

优选地，回流提取的次数为2-3次；

优选地，每次回流提取均于20-30℃的条件下进行2-3h；

优选地，所述白及鳞茎为粉碎过筛后的白及鳞茎粉。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，酶解提取过程中，所述固相物与水的料液比为1g：8-12mL；所述复合酶包括纤维素酶和木瓜蛋白酶，所述纤维素酶的用量为所述固相物的1.2-1.8wt％，所述木瓜蛋白酶的用量为所述固相物的0.8-1.2wt％；

优选地，酶解提取是于52-58℃且pH为5.2-5.8的条件下进行1.5-2.5h；

优选地，酶解提取的次数为2-3次。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，除去所述蛋白质包括：将第一次醇沉后的沉淀经溶解得到的多糖溶液与Sevage试剂混合，待蛋白质变性后离心，除去处于多糖溶液层和Sevage试剂层中间的蛋白质变性层；

优选地，所述多糖溶液与所述Sevage试剂的体积比为2.5-3.5：1；

优选地，离心是将由所述多糖溶液与所述Sevage试剂混合后的混合物摇晃25-35min后，以3800-4200r/min的转速离心8-12min；

优选地，除去所述蛋白质之前，还包括用浓度为92-98vt％的乙醇对第一次醇沉后的沉淀进行洗涤。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，第一次醇沉和第二次醇沉所用的乙醇加入液相物中后，最终浓度均为78-82vt％；

优选地，先将酶解提取后的所述液相物浓缩后再进行第一次醇沉。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，还包括对所述白及粗多糖进行纯化，得到白及多糖；

优选地，纯化包括：采用离子交换柱对所述白及粗多糖进行初步纯化，初步纯化是用纯水、0.08-0.12mol/L的NaCl溶液、0.28-0.32mol/L的NaCl溶液和0.48-0.52mol/L的NaCl溶液依次作为洗脱剂进行梯度洗脱；收集最后洗脱液中活性成分含量最多的部分，得到初纯化白及多糖；

优选地，初步纯化过程中每个洗脱剂的体积为所述离子交换柱的体积的1-2倍；

优选地，所述离子交换柱为DEAE-52纤维素阴离子交换柱；

优选地，纯化还包括：采用凝胶柱对纯化步骤中收集的部分进行再次纯化，再次纯化过程中所用的洗脱剂为去离子水，收集洗脱液中活性成分含量最多的部分；

优选地，再次纯化过程中，洗脱剂的洗脱体积为凝胶柱的体积的1-2倍；

优选地，所述凝胶柱为Sephadex-G100凝胶柱；

优选地，还包括将再次纯化后的洗脱液进行第二次透析，得到终纯化白及多糖；

优选地，第一次透析和第二次透析均于截留分子量为3400-3600Da的透析装置中进行；其中，第一次透析和第二次透析的时间均为48-72h；

优选地，两次透析后，均分别将截留于透析装置内的物质进行干燥。

7.一种白及多糖物质，其特征在于，由权利要求1-6任一项所述的制备方法制备而得；

优选地，所述白及多糖物质包括权利要求1-5任一项所述的制备方法制备得到的白及粗多糖、权利要求6所述的制备方法制备得到的初纯化白及多糖、权利要求6所述的制备方法制备得到的终纯化白及多糖中的至少一种。