[发明专利]玉米促生、益生、生防菌肥一体化制剂及其制备方法

权利要求书

1.玉米促生、益生、生防菌肥一体化制剂，其特征在于：包括阿氏芽孢杆菌C1TB-10、短小芽孢杆菌C1TB-17、阴沟肠杆菌C1TB-26、恶臭假单胞菌C1GB-15、植物乳杆菌C1GB-21、微黄青霉C1TF-23；且阿氏芽孢杆菌C1TB-10、短小芽孢杆菌C1TB-17、阴沟肠杆菌C1TB-26、恶臭假单胞菌C1GB-15、植物乳杆菌C1GB-21、微黄青霉C1TF-23按体积比为1：1：1：1：1：1的比例混合制成；

有效活菌数为：阿氏芽孢杆菌5.0×10⁸cfu/g，短小芽孢杆菌4.0×10⁸cfu/g，阴沟肠杆菌4.0×10⁸cfu/g，恶臭假单胞菌6.0×10⁸cfu/g，植物乳杆菌5.0×10⁸cfu/g，微黄青霉6.0×10⁸cfu/g；其中，

阿氏芽孢杆菌(Bacillusaryabhattai)C1TB-10，于2021年9月9日保存于甘肃省工业微生物菌种保藏中心，保藏号：GSICC 32850；

所述短小芽孢杆菌(Bacilluspumilus)C1TB-17，于2021年9月9日保存于甘肃省工业微生物菌种保藏中心，保藏号：GSICC 32852；

所述阴沟肠杆菌(Enterobactercloacae)C1TB-26，于2021年9月9日保存于甘肃省工业微生物菌种保藏中心，保藏号：GSICC 30522；

所述恶臭假单胞菌(Pseudomonasputida)C1GB-15，于2021年9月9日保存于甘肃省工业微生物菌种保藏中心，保藏号：GSICC 31637；

所述植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)C1GB-21，于2021年9月9日保存于甘肃省工业微生物菌种保藏中心，保藏号：GSICC 31252；

所述微黄青霉(Penicilliumminioluteum)C1TF-23，于2021年9月9日保存于甘肃省工业微生物菌种保藏中心，保藏号：GSICC 61609。

2.根据权利要求1所述的玉米促生、益生、生防菌肥一体化制剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

步骤一：微生物斜面种子的制备：将阿氏芽孢杆菌C1TB-10、短小芽孢杆菌C1TB-17、阴沟肠杆菌C1TB-26、恶臭假单胞菌C1GB-15接种于细菌固体斜面培养基，30℃恒温培养48h后，即为种子斜面；将植物乳杆菌C1GB-21接种于MRS固体斜面培养基，37℃恒温培养48h后，即为种子斜面；将微黄青霉C1TF-23接种于真菌固体斜面培养基，30℃恒温培养48h后，即为种子斜面；

步骤二：微生物液体种子的培养：将阿氏芽孢杆菌C1TB-10、短小芽孢杆菌C1TB-17、阴沟肠杆菌C1TB-26、恶臭假单胞菌C1GB-15接种于细菌液体培养基，在温度为30℃，转速为200r/min震荡培养30h后，即为液体种子；将植物乳杆菌C1GB-21接种于MRS液体培养基，在温度为37℃，转速为200r/min震荡培养30h后，即为液体种子；将微黄青霉C1TF-23接种于真菌液体斜面培养基，在温度为30℃，转速为200r/min震荡培养30h后，即为液体种子；

步骤三：菌株液体扩大培养：将阿氏芽孢杆菌C1TB-10、短小芽孢杆菌C1TB-17、阴沟肠杆菌C1TB-26、恶臭假单胞菌C1GB-15接种于50L发酵罐中，培养基为细菌液体培养基，接种量为10％，在温度为30℃，转速为200r/min培养30h，直至阿氏芽孢杆菌C1TB-10菌液中有效活菌数为5×10⁸CFU/mL，短小芽孢杆菌C1TB-17菌液中有效活菌数为4×10⁸CFU/mL，阴沟肠杆菌C1TB-26菌液中有效活菌数为5×10⁸CFU/mL，恶臭假单胞菌C1GB-15菌液中有效活菌数为6×10⁸CFU/mL；

将植物乳杆菌C1GB-21接种于50L发酵罐中，培养基为MRS液体培养基，接种量为10％，在温度为37℃，转速为200r/min培养30h，直至植物乳杆菌C1GB-21菌液中有效活菌数为4×10⁸CFU/mL；

将微黄青霉C1TF-23接种于50L发酵罐中，培养基为真菌液体培养基，接种量为10％，在温度为30℃，转速为200r/min培养36h，直至菌液中有效活孢子数为6×10⁸CFU/mL；

步骤四：微生物制剂的制备：将步骤三中分别扩大培养的微生物菌剂按体积比1：1：1：1：1：1混合均匀，即得到玉米促生、益生、生防菌肥一体化制剂；

步骤五：微生物菌肥的制备：将步骤四的玉米促生、益生、生防菌肥一体化制剂与有机肥按体积比1:20混合均匀后，即得到玉米促生、益生、生防微生物菌肥。