[发明专利]一种提高花青素含量的花楸干细胞、培养基及培养方法

说明书

一种提高花青素含量的花楸干细胞、培养基及培养方法，培养基可以应用在花楸干细胞合成花青素培养中，培养方法包括以下具体步骤：(1)干细胞组织的制备；(2)花青素的诱导和积累。本发明利用魔芋制成天然培养基，利用魔芋本身的营养物质为所要培养的干细胞提供大量元素、微量元素及碳源；魔芋所含的物质对于干细胞诱导具有促进作用，3‑5d外植体出现膨大，7‑10d干细胞明显增加；魔芋培养基还具有促进花青素合成的作用，花青素含量明显提高；另外，利用魔芋葡甘聚糖的特性使其自身具有良好的凝固性减少琼脂的加入，节约了培养成本，天然的培养基也使其培养的目标产物更加安全可信。

技术领域

本发明属于干细胞培养技术领域，具体涉及一种提高花青素含量的花楸干细胞、培养基及培养方法。

背景技术

黑果花楸(Aronia melanocarpa)属于蔷薇科植物，原产于北美东部，后来传入欧洲及苏联，上世纪90年代引入中国栽培。黑果腺肋花楸多酚类物质功能性研究始于上世纪80年代，随着其在清除自由基、抗癌、降血压、软化血管等方面的功能性逐渐被发现，有关黑果腺肋花楸多酚类物质保健价值也日益显现出来。黑果腺肋花楸果实中富含花青素、类黄酮、酚酸、原花青素等多酚类物质，由于黑果腺肋花楸果实中多酚类物质具有的抗氧化、清除自由基和影响人体代谢的多种能力，长期食用黑果花楸果实对于增强抗突变、保护心脏和降脂的效果明显。

目前，我国一些地方小规模种植黑果花楸，远远不能满足市场日益增加的需求，并且，在生产过程中，存在病虫害肆虐减产、气候和季节限制、重毒副和农药残留等突出问题，而且不同地区和不同年份生产的果实中质量不稳定，花青素等活性成分含量变化大，影响黑果花楸的下游加工和商业化推广；另外，大田种植的黑果花楸果实中单宁类成分含量高，影响深加工产品品质、口感。

为此，能够提供一种培养方法简单、花青素含量高和周期短的花楸干细胞、培养基及其培养方法是本领域技术人员亟需解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种提高花青素含量的花楸干细胞、培养基及培养方法，本发明利用魔芋制成天然培养基，利用魔芋本身的营养物质为所要培养的干细胞提供大量元素、微量元素及碳源；魔芋所含的物质对于干细胞诱导具有促进作用，3-5d外植体出现膨大，7-10d干细胞明显增加；魔芋培养基还具有促进花青素合成的作用；另外，利用魔芋葡甘聚糖的特性使其自身具有良好的凝固性减少琼脂的加入，节约了培养成本，天然的培养基也使其培养的目标产物更加安全可信。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种提高花青素合成含量的花楸干细胞。

一种提高花楸干细胞花青素含量的培养基，所述培养基为魔芋培养基；其中，每升所述魔芋培养基包括：1-3g魔芋粉，0.5-3mgFeCl₂和0.5-5g硝酸钾。

上述所述一种提高花楸干细胞花青素含量培养基的制备方法，包括以下具体步骤：

(1)称取原材料：每升培养基称取1-3g魔芋粉，0.5-3mgFeCl₂和0.5-5g 硝酸钾；

(2)将所述魔芋粉加入1L水中，搅拌均匀后得到魔芋粉溶胀体系；

(3)在所述魔芋粉溶胀体系中加入盐酸溶液后，在40-60℃下水解0.5-3h，水解完成后再加入FeCl₂进行胶联反应；

(4)在所述步骤(3)得到的溶液中加入KNO₃，调pH至5.0-8.0后即得魔芋培养基。

上述所述一种提高花楸干细胞花青素含量培养基的应用，所述培养基在花楸干细胞合成花青素培养中的应用。

优选地，所述盐酸溶液的终浓度为1-2mol/L。

上述一种提高花青素合成含量的花楸干细胞的培养方法，包括以下具体步骤：