[发明专利]一种常温菌低温生长促进剂及其制备和应用

说明书

一种常温菌低温生长促进剂，是以低温莓实假单胞菌接种培养制备的无菌培养液。本发明制备的常温菌低温生长促进剂促进低温下不生长的地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌等常温菌在4℃的低温环境下具有较好的生长趋势，呈现出不同的生长率，其中对于枯草芽孢杆菌促进效果最好，枯草芽孢杆菌在4℃下的生长率达到100%，有效促进常温菌在0‑6℃低温环境下对于秸秆纤维素的降解效率提高31.57%。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种常温菌低温生长促进剂及其制备和应用。

背景技术

我国是农业大国，农作物秸秆作为农业生产过程中的副产品之一，其数量巨大。其中稻草、玉米秸秆和小麦秸秆产量最高、分布最广，约占秸秆资源总量的75％。秸秆还田可以有效地培肥地力、增产增收，但是秸秆粉碎还田成本费用较高，不易在农民中推广，而且作物秸秆中的纤维素类物质很难直接被微生物分解，直接还田自然腐解周期较长，影响土壤墒情、耕作和播种；同时，自然腐解过程中微生物分解秸秆需要从土壤中吸收一定的氮素营养，从而与作物争氮，需要补施氮肥，造成出作物返青期延长，影响作物后期的产量；秸秆降解缓慢造成土壤含氧量低，影响农作物根系生长，容易蔓延病虫害。

东北地区是全国重要的商品粮生产基地，其种植结构主要以玉米作物为主，由于气候适宜再加上种植水平的提高，呈现连年大丰收的“喜人”局面，导致秸秆的产量也随之加大。随着秸秆还田技术的不断推广，秸秆腐熟菌剂应运而生，但其在农业生产应用的过程也出现了一些问题：极端环境地区菌种生长受限，产酶能力降低，尤其东北地区极寒环境下，常温下具有高活性的微生物在该环境下停止生长，无法实现降解作用，只能依靠低温下可以生长的少数微生物对秸秆进行自然降解，且新引进的菌剂与土著微生物之间的拮抗作用无法预料；农田环境影响因子对菌剂的生长产生影响。总体来说，秸秆降解效果不明显，亟需开发其他类型的降解产品。现目前，还没有开发出能使常温菌在低温下生长任何促进剂。

发明内容

本发明的第一个目的是提供一种常温菌低温生长促进剂。

本发明第二个目的在于提供上述常温菌低温生长促进剂的制备方法。

本发明第三个目的是提供上述常温菌低温生长促进剂的应用。

本发明目的通过如下技术方案实现：

一种常温菌低温生长促进剂，其特征在于：所述常温菌低温生长促进剂是以低温莓实假单胞菌(Pseudomonas fragi)接种培养制备的无菌培养液。

培养使用的培养基为LB液体培养基，包括胰蛋白胨10.0g/L,酵母浸粉5.0 g/L，NaCl 5.0g/L。

上述低温莓实假单胞菌(Pseudomonas fragi)是适宜生长温度在5-15℃的低温菌株。本发明低温莓实假单胞菌购买于北京百欧博伟生物技术有限公司，其平台编号为bio-02547，原始编号为L3-1。

本发明中所述的常温菌是在25℃-35℃的常温环境下能快速生长、而在低于该温度生长活性明显下降或停止生长的微生物菌株，上述常温菌包括但不限于大肠杆菌、巨大芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、双歧杆菌、鼠李糖乳杆菌等常温菌株。

一种常温菌低温生长促进剂的制备方法，其特征在于：所述常温菌低温生长促进剂是以低温莓实假单胞菌接种培养制备的无菌培养液，具体是将低温莓实假单胞菌接种于LB液体培养基中培养获得培养液，然后将培养液过滤除菌。

进一步，上述低温莓实假单胞菌是接种量占培养基的体积百分比为0.8～1％。

进一步，上述培养的温度是5～15℃，培养时间为18-24h。

上述莓实单胞菌在低温环境下较快生长，在特定的低温环境生长过程中产生丰富的低温代谢物，特定环境下产生的低温代谢产物作为生长因子促进了常温菌在低温环境下出现高活性生长趋势。