[发明专利]一种用于小梁类细胞标记的双模态纳米探针及其制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种用于小梁类细胞标记的双模态纳米探针及其制备方法和应用，所述双模态纳米探针以PLGA为载体，包被功能性近红外染料cypate和超顺磁性氧化铁纳米粒子SPIO，从而形成PLGA‑Cypate‑SPIO多功能纳米探针。本发明所述的双模态纳米探针作为近红外成像的显影剂，可用于共聚焦荧光显微镜对小梁类细胞进行近红外荧光成像；作为磁共振成像的显影剂，可用于核磁共振成像仪对小梁类细胞进行磁共振成像；同时该磁性纳米探针可作为药物递送载体，可载送包括Rho激酶抑制剂在内的多种药物，实现Rho激酶抑制剂的靶向递送，有效提高小梁网通路房水外排效率。

技术领域

本发明属于纳米材料技术领域，特别涉及一种用于小梁类细胞标记的双模态纳米探针及其制备方法和应用。

背景技术

青光眼是全球第二大致盲原因，主要与眼压升高有关。而小梁网（trabecularmeshwork，TM）是常规房水（aqueous humor，AH）外流通路的重要组成部分，在调节AH流出发挥重要作用。TM功能失调是导致高眼压症和原发性开角型青光眼的主要原因。

目前，药物治疗是降低青光眼患者眼压的主要手段。主要包括用于减少AH产生的经典药物（包括β-肾上腺素能拮抗剂、α-肾上腺素能激动剂和碳酸酐酶抑制剂）、增加AH外流的常见药物（包括胆碱能激动剂和前列腺素类似物）。但由于这些药物尚存在一定的副作用、单药治疗存在一定的局限性，多药治疗患者的依从性较差等问题，这些药物的临床应用始终面临着很大的挑战。

具体来说，上述药物不具靶向性，应用于青光眼患者后，其未靶向作用于小梁网组织结构，可能影响治疗作用的发挥，还有可能破坏其他组织的功能障碍，产生一定副作用。

因此，如何开发一种能够靶向作用于小梁网的药物，是一个需要解决的问题。

发明内容

针对现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提供一种用于小梁类细胞标记的双模态纳米探针及其制备方法和应用，所述纳米探针在不影响细胞生物学特性的前提下，可用于共聚焦荧光显微镜对小梁类细胞进行NIR近红外荧光成像，MRI核磁共振成像示踪细胞，实时监测小梁类细胞的状态；同时该探针可载送药物，使其靶向小梁网，可有效提高药物的治疗效果。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种用于小梁类细胞标记的双模态纳米探针，所述双模态纳米探针以PLGA为载体，包被功能性近红外染料cypate和超顺磁性氧化铁纳米粒子SPIO，从而形成PLGA-Cypate-SPIO多功能纳米探针。

进一步的，所述双模态纳米探针的粒径为200 nm~300 nm。

通过乳化法制备所述双模态纳米探针，其制备方法包括以下步骤：

S1，将PLGA-PEG-COOH充分溶解在二氯甲烷（CH₂Cl₂）中形成PLGA溶液，然后将SPIO和Cypate一起添加到PLGA溶液中，通过使用超声波探头对溶液进行乳化，从而得到第一乳化溶液；

S2，将S1获得的第一乳化溶液缓慢倒入聚乙烯醇（PVA）溶液中，并通过超声波探头进行乳化，从而得到第二乳化溶液；

S3，向S2获得的第二乳化溶液中异丙醇溶液，过夜搅拌从而挥发CH₂Cl₂，再经离心处理后，得到的沉淀即为PLGA-Cypate-SPIO多功能纳米探针，于4 ℃下保存。

进一步的，S1中所述PLGA-PEG-COOH、SPIO和Cypate的重量比为（12.5~50）：（0.4~1.2）：（1~4）。

进一步的，S2中所述聚乙烯醇溶液的质量浓度为3%~5%。

进一步的，S3中所述异丙醇溶液的体积浓度为1%~3%。

进一步的，S3中所述离心处理的条件为10000~12000 rpm离心6~11分钟。