[发明专利]一种细胞表面聚糖的可激活型标记方法在审
| 申请号： | 202111189718.6 | 申请日： | 2021-10-12 |
| 公开（公告）号： | CN115960323A | 公开（公告）日： | 2023-04-14 |
| 发明（设计）人： | 丁霖;鞠熀先;毛安雯;钟彤;谢然;王晓剑 | 申请（专利权）人： | 南京大学 |
| 主分类号： | C08F289/00 | 分类号： | C08F289/00;C08F220/54;G01N21/64 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 210023 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 细胞 表面 聚糖 激活 标记 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种细胞表面聚糖的可激活型标记方法，其特征为在半乳糖氧化酶(GO)表面利用二硫键连接聚合物获得聚糖氧化探针，该探针只有在被还原剂激活后才能氧化细胞表面糖链末端的半乳糖和N-乙酰半乳糖胺(Gal/GalNAc)生成生物正交基团用于细胞聚糖的标记。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在GO的氨基上利用琥珀酰亚胺3-(2-吡啶基二硫基)-丙酸酯结合巯基置换反应连接链引发剂双[2-(2′-溴代异丁酰氧基)乙基]二硫化物，进一步利用原子转移自由基聚合在GO表面原位生长聚异丙基丙烯酰胺(PN)，制备聚糖氧化探针GO-PN。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，GO-PN上的聚合物具有位阻效应，相比于GO，GO-PN对细胞聚糖的氧化活性被抑制90％，在加入细胞相容性还原剂三(2-羧乙基)膦后，二硫键断裂使聚合物离去，GO-PN转变为GO，活性恢复，氧化细胞表面Gal/GalNAc生成生物正交的醛基基团。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，细胞表面Gal/GalNAc上生成的醛基可与酰肼修饰分子发生连接反应形成腙键，实现细胞表面聚糖的标记。
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