[发明专利]一种巨噬细胞焦亡模型的构建方法在审
| 申请号: | 202111182317.8 | 申请日: | 2021-10-11 | 
| 公开(公告)号: | CN114045262A | 公开(公告)日: | 2022-02-15 | 
| 发明(设计)人: | 张林;段书音;姚三巧;张敬;马兰;王丽凤;房蕾;彭延杰;李柏峰;殷浩宇;田家齐 | 申请(专利权)人: | 山东省妇幼保健院 | 
| 主分类号: | C12N5/0786 | 分类号: | C12N5/0786;C12Q1/02 | 
| 代理公司: | 北京云嘉湃富知识产权代理有限公司 11678 | 代理人: | 阮文 | 
| 地址: | 250014 山东*** | 国省代码: | 山东;37 | 
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 巨噬细胞 模型 构建 方法 | ||
1.一种巨噬细胞焦亡模型的构建方法,其特征在于,包括:
1)将对数期的巨噬细胞置于DMEM高糖培养基中预处理,所述DMEM高糖培养基中添加有脂多糖(LPS);
2)预处理后,向所述DMEM高糖培养基中加入纳米二氧化硅粉尘或微米二氧化硅粉尘,继续培养适当时间,即得巨噬细胞焦亡模型。
2.如权利要求1所述的巨噬细胞焦亡模型的构建方法,其特征在于,还包括加入抑制剂干预细胞焦亡状态;所述抑制剂选自ROS清除剂或NLRP3抑制剂中的一种或两种;优选地,所述ROS清除剂为N-乙酰半胱氨酸(NAC);所述NLRP3抑制剂为MCC950;更优选地,在预处理细胞前加入MCC950并处理1h;或者在加入二氧化硅粉尘前加入NAC处理细胞30min。
3.如权利要求1所述的巨噬细胞焦亡模型的构建方法,其特征在于,步骤1)中所述DMEM高糖培养基含体积分数为10%胎牛血清(FBS)和1%青霉素-链霉素双抗。
4.如权利要求1所述的巨噬细胞焦亡模型的构建方法,其特征在于,步骤1)中所述DMEM高糖培养基中的LPS浓度为1μg/mL。
5.如权利要求1所述的巨噬细胞焦亡模型的构建方法,其特征在于,步骤2)中DMEM高糖培养基中所述纳米二氧化硅粉尘的浓度为100μg/mL;微米二氧化硅粉尘的浓度为750μg/mL。
6.如权利要求1所述的巨噬细胞焦亡模型的构建方法,其特征在于,所述纳米二氧化硅粉尘的粒径为20nm,纯度99%,微米二氧化硅粉尘的粒径为0.5-10μm,纯度99%。
7.如权利要求1所述的巨噬细胞焦亡模型的构建方法,其特征在于,步骤1)中所述预处理时间为6小时。
8.如权利要求1所述的巨噬细胞焦亡模型的构建方法,其特征在于,步骤2)所述继续培养时间为4小时。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的构建方法构建得到的巨噬细胞焦亡模型。
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