[发明专利]一种巨噬细胞焦亡模型的构建方法在审

专利信息
申请号: 202111182317.8 申请日: 2021-10-11
公开(公告)号: CN114045262A 公开(公告)日: 2022-02-15
发明(设计)人: 张林;段书音;姚三巧;张敬;马兰;王丽凤;房蕾;彭延杰;李柏峰;殷浩宇;田家齐 申请(专利权)人: 山东省妇幼保健院
主分类号: C12N5/0786 分类号: C12N5/0786;C12Q1/02
代理公司: 北京云嘉湃富知识产权代理有限公司 11678 代理人: 阮文
地址: 250014 山东*** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 一种 巨噬细胞 模型 构建 方法
【权利要求书】:

1.一种巨噬细胞焦亡模型的构建方法,其特征在于,包括:

1)将对数期的巨噬细胞置于DMEM高糖培养基中预处理,所述DMEM高糖培养基中添加有脂多糖(LPS);

2)预处理后,向所述DMEM高糖培养基中加入纳米二氧化硅粉尘或微米二氧化硅粉尘,继续培养适当时间,即得巨噬细胞焦亡模型。

2.如权利要求1所述的巨噬细胞焦亡模型的构建方法,其特征在于,还包括加入抑制剂干预细胞焦亡状态;所述抑制剂选自ROS清除剂或NLRP3抑制剂中的一种或两种;优选地,所述ROS清除剂为N-乙酰半胱氨酸(NAC);所述NLRP3抑制剂为MCC950;更优选地,在预处理细胞前加入MCC950并处理1h;或者在加入二氧化硅粉尘前加入NAC处理细胞30min。

3.如权利要求1所述的巨噬细胞焦亡模型的构建方法,其特征在于,步骤1)中所述DMEM高糖培养基含体积分数为10%胎牛血清(FBS)和1%青霉素-链霉素双抗。

4.如权利要求1所述的巨噬细胞焦亡模型的构建方法,其特征在于,步骤1)中所述DMEM高糖培养基中的LPS浓度为1μg/mL。

5.如权利要求1所述的巨噬细胞焦亡模型的构建方法,其特征在于,步骤2)中DMEM高糖培养基中所述纳米二氧化硅粉尘的浓度为100μg/mL;微米二氧化硅粉尘的浓度为750μg/mL。

6.如权利要求1所述的巨噬细胞焦亡模型的构建方法,其特征在于,所述纳米二氧化硅粉尘的粒径为20nm,纯度99%,微米二氧化硅粉尘的粒径为0.5-10μm,纯度99%。

7.如权利要求1所述的巨噬细胞焦亡模型的构建方法,其特征在于,步骤1)中所述预处理时间为6小时。

8.如权利要求1所述的巨噬细胞焦亡模型的构建方法,其特征在于,步骤2)所述继续培养时间为4小时。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的构建方法构建得到的巨噬细胞焦亡模型。

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