[发明专利]能特异性识别多种沙门氏菌血清型的单克隆抗体及制备方法、检测试剂盒与应用

说明书

本发明公开能特异性识别多种沙门氏菌血清型的单克隆抗体及制备方法、检测试剂盒与应用。两种能特异性识别多种沙门氏菌血清型的单克隆抗体，所述两种单克隆抗体分别命名为SP1和SP3。本发明中提供的SP1和SP3抗体能特异性识别多种血清型的沙门氏菌，并可结合ELISA技术，实现对多种血清型的沙门氏菌进行实时检测分析。本发明的抗体一方面可以制成具有较大潜力的、用来对抗沙门氏菌的药物，另一方面该抗体也可以用来开发出一系列能够特异性检测沙门氏菌的方法，同时也可以简化食源性沙门氏菌检测步骤，预警沙门氏菌污染，为食物安全提供重要保障。

技术领域

本发明涉及微生物检测领域，尤其涉及能特异性识别多种沙门氏菌血清型的单克隆抗体及制备方法、检测试剂盒与应用。

背景技术

自抗生素时代开启以来，人类曾以为在和致病细菌之间的抗争中我们会一直保持优势。随着抗生素的广泛使用，甚至滥用，人们开始面临另一个来自这些微小微生物的威胁：抗药性问题。然后科研工作者们投入更大的精力优化已有抗生素，同时开发新型的复合抗生素以对抗这些“超级细菌”。但近年来随着NDM-1抗药性基因的发现，以及刚发现的MCR-1新型耐药基因，我们原本以为不可攻破的抗生素最后一道防线也岌岌可危了。

沙门氏菌属革兰氏阴性肠道杆菌，目前已获鉴定的有上千种血清型。它们是常见的食源性致病菌之一，能引起人体疾病的主要有伤寒杆菌、副伤寒杆菌和副伤寒乙杆菌。每年仅伤寒沙门氏菌感染就导致1600万人生病，60万人死亡，导致严重的经济和社会负担。沙门氏菌具有较强的环境适应性和较长的潜伏期，这些特征为感染的持续性或复发性埋下了很大隐患。目前虽然有很多种抗生素可以用来对抗沙门氏菌感染，但这些抗生素往往对新型的变异种无效。另外，基于抗体或核酸的检测方法在一定程度上可以预防沙门氏菌感染的发生，但这些检测方法也都具有各自的局限性，比如只能检测某一种或几种血清型等。同时，传统的检测方法，例如基于培养的，实施PCR的，甚至是基于纳米材料的新开发的检测方法，都非常耗时或者需要昂贵的设备，都或多或少存在一些缺点和局限性。

因此，现有技术还有待于改进和发展。

发明内容

鉴于上述现有技术的不足，本发明的目的在于提供能特异性识别多种沙门氏菌血清型的单克隆抗体及制备方法、检测试剂盒与应用，旨在解决现有抗体只能检测某一种或几种血清型沙门氏菌的问题。

本发明的技术方案如下：

两种能特异性识别多种沙门氏菌血清型的单克隆抗体，其中，所述两种单克隆抗体分别命名为SP1和SP3，

其中SP1抗体的重链1如SEQ ID No.1所示，SP1抗体的重链2如SEQ ID No.2所示，SP1抗体的轻链1如SEQ ID No.3所示，SP1抗体的轻链2如SEQ ID No.4所示；

其中SP3抗体的重链1如SEQ ID No.5所示，SP3抗体的重链2如SEQ ID No.6所示，SP3抗体的轻链1如SEQ ID No.7所示，SP3抗体的轻链2如SEQ ID No.8所示。

可选地，所述两种单克隆抗体能特异性识别的沙门氏菌血清型包括：S.Enteritidis、S.Derby、S.Weltevreden、S.Stanley、S.Infantis、S.Thompson、S.Albany、S.Reading、S.Fayed、S.Indiana、S.Typhimurium、S.Blockley、S.Virchow、S.Bovismorbificans、S.Newport、S.Kottbus、S.Corvallis、S.Kallo、S.Litchfield、S.Singapore、S.Montevideo、S.Menden、S.Braendemp、S.Mbandaka、S.Potsdam、S.Bareilly、S.Wandsworth、S.Paratyphi A、S.Typhi、S.Bareilly、S.typhimurium LT2、S.SaintPaul。

本发明所述的单克隆抗体的制备方法，其中，包括步骤：