[发明专利]液相色谱串联质谱测定饲料中驱虫药残留的方法

权利要求书

1.液相色谱串联质谱测定饲料中驱虫药残留的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)用乙腈或甲醇对待测饲料样品进行粗提，得到样品粗提液；

2)用正己烷或异辛烷对样品粗提液进行萃取，所得萃取液再用乙腈进行提取，得到样品提取液；

3)样品提取液过固相萃取柱进行浓缩和净化，得到待测样品溶液；

4)采用液相色谱串联质谱测定待测样品溶液中驱虫药的残留量；

所述驱虫药选自阿维菌素、伊维菌素、多拉菌素、埃普利诺菌素、莫西菌素和米尔贝霉素中的至少一种。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述饲料为配合饲料、浓缩饲料、添加剂预混合饲料或精料补充料。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤1)包括：称取0.5～10g待测饲料样品于离心管中，加入乙腈5～100mL，涡动1min，25～65℃条件下100～500r/min振荡30～60min；-4～25℃条件下3500～10000r/min离心10min；取上清液于另一离心管中，下层残渣加乙腈5～100mL重复提取一次，-4～25℃条件下8000r/min离心10min，合并两次提取液，即为样品粗提液。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，对于配合饲料样品，步骤2)包括：取2.5mL样品粗提液，加入0.5～1.5mL水和1～2mL正己烷，涡动10～60s，3500～10000rpm离心10min，除去上层正已烷；下层再加1.5mL正己烷重复萃取一次，转移下层至另一管中，于65℃氮气吹至2mL，加入8mL水和10mL的正己烷萃取，混匀1min，然后-4～4℃条件下，3500～10000r/min离心10min，弃下层，转移上层正己烷溶液至10mL离心管中，55℃氮吹干；用2mL乙腈复溶，再加入4mL正己烷，涡旋1min；将下层乙腈溶液转移至另一管中，氮吹至1mL，加入5mL水，涡动混匀，即为样品提取液。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，对于浓缩饲料、添加剂预混合饲料和精料补充料，步骤2)包括：取2.5mL样品粗提液，加入1.5mL正己烷，涡动30s，8000rpm离心10min，除去上层正已烷；下层再加1.5mL正己烷重复萃取一次，转移提取液至另一管中，从而除去上层正已烷和底部少许残渣；下层提取液用65℃氮气吹至1mL，加入5mL水，涡动混匀，即为样品提取液。

6.根据权利要求4或5所述的方法，其特征在于，步骤3)包括：将固相萃取柱先用乙腈或甲醇5mL活化，再用5～18％乙腈淋洗液5mL平衡后，将样品提取液加载于该固相萃取柱上；依次用15～18％甲醇淋洗液5～10mL和15～18％乙腈淋洗液5～10mL洗柱，挤干水分；然后用5～10mL甲醇洗脱，45～65℃氮气吹干，加入70～98％甲醇溶液1mL溶解，用孔径0.22μm滤膜过滤，即为待测样品溶液；

其中所述固相萃取柱为HLB柱或C18柱。

7.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，液相色谱条件为：色谱柱：ACQUITY UPLCBEH Shield RP18，1.7μm，2.1mm×50mm；柱温40℃，流速0.2mL/min，采用流动相A和B进行梯度洗脱；

A：0.3％甲酸水溶液，B：甲醇或乙腈；

梯度洗脱程序如下：

8.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，质谱条件为：Water UPLC高效液相色谱-Micromass Quttra LC串联四极杆质谱仪；电喷雾离子源；扫描方式：正离子扫方式；检测方式：多反应离子监测模式；电喷雾毛细管电压：2.8kV；离子源温度：100℃；去溶剂温度：320℃；脱溶剂气体流量：630L/h；碰撞气流量：33L/h；雾化器压力3.0V；射频电压：0.5V；低分辨率1和2：10.0；高分辨率1和2：11.0；离子能1和2：1；扩增器电压：700V；加热辅助气压力：3.20e-3。