[发明专利]可溶性CD206在制备抗中性粒细胞胞浆抗体相关性血管炎诊断试剂盒中的应用

说明书

本发明提供可溶性CD206在制备抗中性粒细胞胞浆抗体相关性血管炎诊断试剂盒中的应用，本发明公开了可溶性CD206可以作为抗中性粒细胞胞浆抗体相关性血管炎诊断标志物。提供检测可溶性CD206表达水平的试剂在制备抗中性粒细胞胞浆抗体相关性血管炎诊断试剂或试剂盒中的应用，特异性强并且灵敏度高，通过检测可溶性CD206水平，可预测抗中性粒细胞胞浆抗体相关性血管炎等自身免疫疾病活动，为临床治疗提供参考依据。

技术领域

本发明涉及生物医学检测技术领域，尤其涉及可溶性CD206在制备抗中性粒细胞胞浆抗体相关性血管炎疾病活动诊断试剂或试剂盒中的应用。

背景技术

抗中性粒细胞胞浆抗体(Anti-neutrophil cytoplasmic antibodies，ANCA)相关性血管炎(ANCA-associated vasculitis，AAV)是一类以中小血管损害为主，累及多脏器的自身免疫性疾病。当疾病累及肾脏时，可引起以肾小球纤维素样坏死和新月体形成为主要病理特征的寡免疫复合物型肾小球肾炎。既往认为，AAV是一种少见病，故而未受到临床重视，但近来研究表明，AAV发病率有逐年增高的趋势，已不再是罕见病和少见病。AAV病情重，预后差，若未得以及时诊断或治疗，死亡率可达90％甚至更高。血清中出现ANCA是AAV的重要发病原因和特征之一，ANCA与中性粒细胞表面蛋白酶3(proteinase 3，PR3)、髓过氧化物酶(myeloperoxidase，MPO)等靶抗原结合，激活中性粒细胞释放炎症因子、超氧化物等促炎性物质损伤血管壁是AAV的主要发病机制之一。

近年来，多项研究表明单核/巨噬细胞在AAV的发病过程中也起重要作用。ANCA靶抗原不仅表达于中性粒细胞胞浆，也表达于单核细胞中过氧化物酶阳性的溶酶体中。ANCA相关性肾小球肾炎发病早期即有大量的单核/巨噬细胞浸润，不仅存在于纤维素样坏死和细胞性新月体等早期损伤部位，也存在于尚为正常的肾小球中。伴随病情进展，单核/巨噬细胞主要聚集于新月体、纤维素样坏死等肾脏损伤部位，提示单核/巨噬细胞与AAV肾损伤的起始和发展密切相关。

单核/巨噬细胞是一类重要的免疫细胞。激活的单核细胞可分化为巨噬细胞，巨噬细胞在不同的微环境中具有较强的异质性，根据其表型和功能的不同主要分为经典激活巨噬细胞(classically activated macrophage,M1巨噬细胞)和替代激活巨噬细胞(alternatively activated macrophage,M2巨噬细胞)，这一过程称为巨噬细胞极化。M1巨噬细胞具有促炎能力，细胞表面高表达CD80分子，可以与T细胞表面受体结合激活T细胞，同时胞内高表达一氧化氮合酶iNOS，将精氨酸代谢为一氧化氮，参与炎症反应；M2巨噬细胞则与抗炎、组织修复和纤维化有关，胞内高表达精氨酸酶arg-1，在不同刺激因子作用下，M2巨噬细胞进一步可分为M2a、M2b、M2c巨噬细胞等亚型。M2a巨噬细胞表面高表达甘露糖受体CD206，M2c巨噬细胞表面高表达清道夫受体CD163。

正常生理情况下，CD206可识别病原相关分子模式或损伤相关分子模式，介导抗原呈递、内化损伤成分、调节细胞活性与细胞转运。有研究表明，当细胞受到脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)、酵母多糖或ATP等炎性刺激时，CD206可被蛋白酶切割，其胞外段脱落，形成可溶性CD206(soluble CD206，sCD206)。目前暂无CD206⁺巨噬细胞活化和sCD206在AAV中表达特点的相关报道。

评估AAV疾病活动性对改善AAV预后至关重要。尽管AAV发病与ANCA密切相关，但以ANCA滴度评估AAV疾病活动性存在较大争议。金黄色葡萄球菌、结核分枝杆菌等感染可引起血清ANCA滴度升高，但并不代表AAV出现进展。此外，有研究表明，约40％的AAV患者在非活动期仍出现ANCA滴度的上升，并在缓解期仍维持在较高水平。因此，ANCA滴度并不能准确反映AAV的疾病活动性。