[发明专利]一种具有免疫调节活性的点柄乳牛肝菌多糖SGP2-1及其制备方法和应用

说明书

本发明属于食用菌多糖研究领域，公开了一种具有免疫调节活性的点柄乳牛肝菌多糖SGP2‑1及其制备方法和应用。SGP2‑1是由点柄乳牛肝菌子实体热水浸提和分级醇沉提取，并经离子交换柱和凝胶柱分离纯化得到的均一多糖，其主要重复单元的结构如下所示，重均分子量为150.75kDa。经体外免疫调节活性研究，SGP2‑1可被模式识别受体TLR2识别以激活巨噬细胞，显著增强小鼠单核巨噬细胞RAW264.7细胞活力及吞噬能力，促进小鼠单核巨噬细胞RAW264.7产生ROS、NO、细胞因子和趋化因子，以发挥免疫调节作用。本发明的多糖可作为潜在的免疫调节剂，用于功能性食品或药物的开发。

技术领域

本发明属于食用菌多糖研究领域，特别涉及一种具有免疫调节活性的点柄乳牛肝菌多糖SGP2-1及其制备方法和应用。

背景技术

食用菌多糖具有多种功能活性，包括免疫调节、抗肿瘤、抗氧化、抗炎、降血糖血脂等，其中，免疫调节活性是多糖被研究得最广泛、最深入的生理活性，多糖可通过直接或间接方式激活巨噬细胞、T/B淋巴细胞、促进和补充干扰素、白介素、肿瘤坏死因子等多种方式来调节和改善机体的免疫系统，并与其他抗癌、抗病毒等功能相关，因此多糖在功能性食品以及药物开发上具有重要应用价值。

点柄乳牛肝菌(Suillus granulatus)，别名松蘑、栗壳牛肝菌，属于担子菌门(Basidiomycota)、层菌纲(Hymenomycetes)、牛肝菌目(Boletales)，是油松林地的常见外生菌根，其广泛分布于云南、四川、贵州、黑龙江等省区，点柄乳牛肝菌含有多糖、麦角固醇、人体必需氨基酸、微量元素等多种生物活性物质，具有抗肿瘤、抗氧化、抗菌、抗病毒等多种功能活性。但目前对点柄乳牛肝菌多糖的链结构解析及免疫调节活性未做深入研究。

发明内容

为了克服现有技术的缺点和不足，本发明的首要目的在于提供一种具有免疫调节活性的点柄乳牛肝菌多糖。

本发明的另一目的在于提供一种上述具有免疫调节活性的点柄乳牛肝菌多糖的制备方法；本发明以点柄乳牛肝菌子实体为研究对象，通过热水浸提和分级醇沉提取，经DEAE离子交换柱以及分子筛进行分离纯化并研究其生物活性，解析了点柄乳牛肝菌多糖SGP2-1新成分的单糖组成、糖苷键连接方式、链结构等。

本发明的再一目的在于提供一种上述具有免疫调节活性的点柄乳牛肝菌多糖的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种具有免疫调节活性的点柄乳牛肝菌多糖SGP2-1，该点柄乳牛肝菌多糖SGP2-1的主要重复单元的结构如下所示，重均分子量为150.75kDa：

所述点柄乳牛肝菌多糖SGP2-1的糖含量为94.84wt％。

所述点柄乳牛肝菌多糖SGP2-1主要由摩尔比为2.4:28.2:1.0的甘露糖、葡萄糖和木糖组成。

上述的点柄乳牛肝菌多糖SGP2-1的制备方法，包括以下步骤：

(1)将粉碎过筛的点柄乳牛肝菌粉末脱脂处理，干燥后得到点柄乳牛肝菌脱脂粉末；

(2)向点柄乳牛肝菌脱脂粉末中加去离子水，提取多次，过滤后合并上清液，减压浓缩，得浓缩液；

(3)浓缩液经分级醇沉、复溶沉淀、除蛋白、透析、冷冻干燥后获得粗多糖冻干粉；

(4)取粗多糖冻干粉配置成粗多糖溶液，经离子交换柱分离洗脱，苯酚硫酸法测定，收集目标组分峰洗脱产物，经浓缩、透析、冷冻干燥后获得SGP2组分；

(5)将SGP2组分经分子筛进一步分离，采用苯酚-硫酸法检测多糖含量，收集目标组分峰洗脱产物，合并后的溶液经浓缩、透析、冷冻干燥后得到点柄乳牛肝菌多糖SGP2-1。