[发明专利]一种H7N9亚型禽流感病毒样颗粒疫苗制剂及制备和应用有效
| 申请号： | 202111130198.1 | 申请日： | 2021-09-26 |
| 公开（公告）号： | CN113827714B | 公开（公告）日： | 2023-07-14 |
| 发明（设计）人： | 樊惠英;孔德鑫;廖明;陈陶然;胡小龙 | 申请（专利权）人： | 华南农业大学 |
| 主分类号： | A61K39/145 | 分类号： | A61K39/145;A61K39/39;A61K39/385;A61P31/16;C07K19/00;C07K14/11;C12N15/62;C12N15/866;C12N7/01 |
| 代理公司： | 佛山市君创知识产权代理事务所(普通合伙) 44675 | 代理人： | 许菲菲 |
| 地址： | 510640 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 h7n9 禽流感 病毒 颗粒 疫苗 制剂 制备 应用 | ||
1.一种H7N9亚型禽流感病毒样颗粒疫苗制剂，其特征在于包含重组嵌合蛋白HMN和H7N9亚型禽流感病毒样颗粒，其中，所述的重组嵌合蛋白HMN由禽流感病毒保守性抗原表位、蜂毒信号肽以及6x-His标签蛋白嵌合而成；
所述的禽流感病毒保守性抗原表位包含禽流感病毒血凝素蛋白HA2的第76-130位氨基酸残基、禽流感病毒基质蛋白M2胞外域的第2-24位氨基酸残基和禽流感病毒核蛋白NP的第55-69位氨基酸残基中的至少一种；
所述的H7N9亚型禽流感病毒样颗粒的制备方法为：将HA基因重组杆状病毒、NA基因重组杆状病毒和M1基因重组杆状病毒按照MOI=2：1：2共同感染昆虫细胞，收取细胞外培养上清，得到HA、NA和M1蛋白组装而成的禽流感病毒样颗粒；
所述的禽流感病毒血凝素蛋白HA2的第76-130位氨基酸残基的序列如SEQ ID NO:1所示；
所述的禽流感病毒基质蛋白M2胞外域第的2-24位氨基酸残基的氨基酸序列如SEQ IDNO:2所示；
所述的禽流感病毒核蛋白NP的第55-69位氨基酸残基的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示；
所述的蜂毒信号肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示；
所述的6x-His标签蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示。
2.根据权利要求1所述的H7N9亚型禽流感病毒样颗粒疫苗制剂，其特征在于：
所述的禽流感病毒基质蛋白M2胞外域的第2-24位氨基酸残基为具有四个拷贝的串联重复，各拷贝之间由柔性连接分子linker进行连接，所述的柔性连接分子的氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示；
所述的禽流感病毒核蛋白NP的第55-69位氨基酸残基为具有八个拷贝的串联重复，各拷贝之间由柔性连接分子linker进行连接，所述的柔性连接分子的氨基酸序列如SEQ IDNO:7所示；
所述的禽流感病毒血凝素蛋白HA2的76-130位氨基酸残基为具有两个拷贝的串联重复，两个拷贝之间由柔性连接分子linker进行连接，所述的柔性连接分子的氨基酸序列如SEQ ID NO:8所示。
3.根据权利要求1所述的H7N9亚型禽流感病毒样颗粒疫苗制剂，其特征在于：
所述的重组嵌合蛋白HMN还包括柔性连接分子linker，所述的柔性连接分子实现对蜂毒信号肽、禽流感病毒血凝素蛋白HA2的76-130位氨基酸残基、禽流感病毒基质蛋白M2胞外域的第2-24位氨基酸残基和禽流感病毒核蛋白NP的第55-69位氨基酸残基之间的连接，所述的柔性连接分子的氨基酸序列如SEQ ID NO:8所示。
4.根据权利要求1~3任一项所述的H7N9亚型禽流感病毒样颗粒疫苗制剂，其特征在于：
所述的重组嵌合蛋白HMN的氨基酸序列如SEQ ID NO:9所示。
5.根据权利要求4所述的H7N9亚型禽流感病毒样颗粒疫苗制剂，其特征在于：
编码所述的重组嵌合蛋白HMN的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:10所示。
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