[发明专利]基于纸喷雾质谱快速分析低分子糖的方法及其应用

说明书

本发明涉及一种基于纸喷雾质谱快速分析低分子糖的方法，所述方法是采用纸喷雾离子化质谱对含有特定糖的团簇离子(由糖分子、手性氨基酸配体及过渡金属离子形成)进行检测，然后计算R值作为区分常见低分子糖的判断依据；所述R值为团簇离子经过碰撞诱导解离失去一分子配体的产物离子的强度与失去一分子糖的产物离子的强度之比。本发明的方法是采用含有特定糖的团簇离子作为分析物，我们规定了R值的计算方法为两个产物离子之间的强度比，使方法不仅可以应用于单糖分析，也可以分析更复杂的寡糖。同时使用纸喷雾离子化质谱进行分析，具备直接分析复杂样本(无需前处理或仅需简单前处理)的能力，可实现对临床干血浆样品的直接快速分析。

技术领域

本发明涉及低分子糖类结构的分析方法，具体涉及基于纸喷雾质谱快速分析低分子糖的方法及其应用。

背景技术

糖类也被称为碳水化合物，其定义为多羟基醛、多羟基酮以及能水解而生成多羟基醛或多羟基酮的有机化合物。复杂多样的糖类在自然界几乎在所有细胞中都普遍存在的，是所有生命形式必不可少的，它们在生物系统中起着主要的代谢、结构和物理作用。例如，糖类可以为细胞提供能量，并作为植物细胞壁的结构成分。通过与蛋白质和脂质结合，糖类广泛参与细胞内运输、细胞粘附、细胞间相互作用等。糖分子具有结构多样性，糖分子中羰基的位置、糖环内碳原子个数、构型等等，导致糖类有非常复杂多样的异构体。D-或L-构型由距离羰基最远的不对称碳原子决定：在标准Fisher投影中，羟基在右侧的是D-糖，而在左侧的是L-糖。在糖分析中，有必要确定每个单糖单元及其立体化学特性，以及寡糖的单糖组成、连接位点和糖苷键构型等。

糖结构分析常用的方法主要有核磁共振(NMR)、色谱和质谱(MS)。高维NMR是常规用来获取糖类详细结构信息的有力工具。然而，NMR分析通常需要毫克级的纯化后的样品，这意味着对样品量和样品纯度的要求都很高。色谱分析结合使用糖标准品作为对照也是区分糖的常用方法。已有方法包括使用气相色谱(GC)、高效液相色谱(HPLC)和毛细管电泳(CE)。然而，色谱方法也受到许多限制，这主要是由糖类固有的结构特征所决定的。在色谱进样之前通常需要额外的柱前衍生化步骤，以获得更好的检测效果，或更好的分离效果。衍生化不仅耗时，而且还可能导致分析操作中更大的误差和复杂程度。质谱方法因其灵敏度高、分辨率高、样品用量小而被广泛应用于糖类的结构分析，质谱也可作为“检测器”与色谱联用。