[发明专利]一种苹果酸溶液中草酰乙酸含量的检测方法

说明书

本发明公开了一种苹果酸溶液中草酰乙酸含量的检测方法，包括系统适用性溶液：取草酰乙酸对照品、苹果酸对照品各适量，用流动相溶解并稀释制成每1ml中约含苹果酸20μg、草酰乙酸10μg的溶液；供试品溶液：精密量取0.17％苹果酸溶液1ml，置10ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀；对照品溶液：取草酰乙酸对照品适量，用流动相溶解并稀释制成每1ml中约含草酰乙酸10μg的溶液；本发明通过高效液相色谱法对苹果酸溶液中的草酰乙酸进行杂质检测，实现了苹果酸降解产物草酰乙酸的精确控制，为生产工艺或制备过程提供依据；同时该方法可用于草酰乙酸含量测定，为草酰乙酸应用于疾病治疗提供检测手段。

技术领域

本发明属于食药化学制药技术领域，具体涉及一种苹果酸溶液中草酰乙酸含量的检测方法。

背景技术

苹果酸用途广泛，除在食品、饮料、化妆品、驱虫剂、抗牙垢剂等方面广泛应用外，在医药中可用于治疗肝病、贫血、免疫力低下、尿毒症、高血压、肝衰竭等多种疾病，并能减轻抗癌药物对正常细胞的毒害作用，在药品制剂中苹果酸作为原辅料常常出现，此类产品作用人体，杂质控制是保证产品质量的关键。

由于在氧化、光照及高温条件下，苹果酸会不同程度的降解，其主要的降解产物为草酰乙酸，目前草酰乙酸的检测手段主要有生物免疫检测技术以及高效液相检测技术，生物免疫技术易受到交叉免疫的干扰且价格昂贵，而基于高效液相色谱检测草酰乙酸的色谱技术在市面上鲜有报道，已有的检测方法对于样品的前处理普遍繁琐，损失率较高。因此急需准确高效的草酰乙酸含量测定方法。

本发明中采用高效液相法，对苹果酸溶液中的草酰乙酸含量进行了有效检测，并对方法进行了验证，各验证指标均良好，方法可靠性高。

发明内容

本发明提供了一种苹果酸溶液中草酰乙酸含量的测定方法，以确保苹果酸的主要降解产物得到有效控制，同时为其他产品中草酰乙酸含量检测提供技术支持。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种苹果酸溶液中草酰乙酸含量的检测方法，包括1)系统适用性溶液：取草酰乙酸对照品、苹果酸对照品各适量，用流动相溶解并稀释制成每1ml中约含苹果酸20μg、草酰乙酸10μg的溶液；

2)供试品溶液：精密量取0.17％苹果酸溶液1ml，置10ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀；

3)对照品溶液：取草酰乙酸对照品适量，用流动相溶解并稀释制成每1ml中约含草酰乙酸10μg的溶液；

4)测定法：精密量取供试品溶液与对照品溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图；采用外标法以草酰乙酸峰的峰面积计，记录计算结果。

优选的，色谱条件为用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(OAA，4.6mm×300mm)；以0.03mol/L磷酸二氢钠溶液(称取无水磷酸二氢钠3.6g，置1000ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，混匀，用磷酸调节pH值至2.70)-甲醇(99:1)为流动相；检测波长为210nm；流速为每分钟0.5ml；柱温为25℃；进样体积20μl。

优选的，系统适用性要求为：系统适用性溶液色谱图中，出峰顺序为草酰乙酸、苹果酸，苹果酸峰与草酰乙酸峰间的分离度应不小于2.0。

优选的，所有量取完毕的溶液需要在进行封口在常温下存放。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明通过高效液相色谱法对苹果酸溶液中的草酰乙酸进行杂质检测，实现了苹果酸降解产物草酰乙酸的精确控制，为生产工艺或制备过程提供依据；同时该方法可用于草酰乙酸含量测定，为草酰乙酸应用于疾病治疗提供检测手段。

附图说明

图1为本发明的苹果酸溶液全波长扫描示意图；

图2为本发明的草酰乙酸溶液全波长扫描示意图；

图3为本发明的专属性流动相图谱；