[发明专利]一种牙髓或牙髓干细胞的冻存液在审
| 申请号: | 202111077992.4 | 申请日: | 2021-09-15 |
| 公开(公告)号: | CN113678818A | 公开(公告)日: | 2021-11-23 |
| 发明(设计)人: | 辛秉昌;吴迪;刘学玉;宋佳;王芳;孙德刚 | 申请(专利权)人: | 青岛市口腔医院 |
| 主分类号: | A01N1/02 | 分类号: | A01N1/02 |
| 代理公司: | 济南市新图新夏天专利代理事务所(普通合伙) 37330 | 代理人: | 张伟彦 |
| 地址: | 266000 山东省青*** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 牙髓 干细胞 冻存液 | ||
1.一种牙髓或牙髓干细胞的冻存液,其特征在于,包括以下百分比的原料:胎牛血清12-18%、羟乙基淀粉3-5%、色甘酸钠2-7%、甘油8-15%、十二烷基硫酸钠1-2%、右旋葡萄糖5-15%、乙二胺四乙酸二钠二水合物2-5%、余量为培养基。
2.根据权利要求1所述的一种牙髓或牙髓干细胞的冻存液,其特征在于,包括以下重量百分比的原料:胎牛血清14-16%、羟乙基淀粉3.5-4.5%、色甘酸钠3-6%、甘油10-14%、十二烷基硫酸钠1.2-1.8%、右旋葡萄糖8-12%、乙二胺四乙酸二钠二水合物3-4%、余量为培养基。
3.根据权利要求1所述的一种牙髓或牙髓干细胞的冻存液,其特征在于,包括以下百分比的原料:胎牛血清15%、羟乙基淀粉4%、色甘酸钠4.5%、甘油12%、十二烷基硫酸钠1.5%、右旋葡萄糖10%、乙二胺四乙酸二钠二水合物3.5%、余量为培养基。
4.根据权利要求1所述的一种牙髓或牙髓干细胞的冻存液,其特征在于,所述培养基为DMEM、RPMI1640或DMEM/F12中的一种。
5.根据权利要求1所述的一种牙髓或牙髓干细胞的冻存液,其特征在于,所述冻存液冻存牙髓或牙髓干细胞的方法如下:
S1、准备冻存液制备用原料,包括胎牛血清、羟乙基淀粉、色甘酸钠、甘油、十二烷基硫酸钠、右旋葡萄糖、乙二胺四乙酸二钠二水合物和培养基;
S2、先将胎牛血清、羟乙基淀粉、甘油和右旋葡萄糖依次加入到培养基中,加入牙髓或牙髓干细胞,在0-5℃的温度下,预冷20-30min,然后加入色甘酸钠、十二烷基硫酸钠和乙二胺四乙酸二钠二水合物,先第一次降温至-48℃,预冻20-40min,继续第二次降温至-80℃,冷冻3-5h后,转移至液氮中保存即可。
6.根据权利要求5所述的一种牙髓或牙髓干细胞的冻存液,其特征在于,所述步骤S2中第一次降温速率为2.4-3.8℃/min。
7.根据权利要求5所述的一种牙髓或牙髓干细胞的冻存液,其特征在于,所述步骤S2中第二次降温速率为0.8-1.5℃/min。
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