[发明专利]一种阿维菌素高产菌株的选育方法在审
| 申请号: | 202111064778.5 | 申请日: | 2021-09-11 |
| 公开(公告)号: | CN115806969A | 公开(公告)日: | 2023-03-17 |
| 发明(设计)人: | 王鸿发;郭佳;丁立波;王少云 | 申请(专利权)人: | 宁夏泰益欣生物科技有限公司 |
| 主分类号: | C12N15/01 | 分类号: | C12N15/01;C12N1/02;G01N30/02;G01N30/06;G01N30/74;C12R1/545 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 750205 宁夏回族自治*** | 国省代码: | 宁夏;64 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 菌素 高产 菌株 选育 方法 | ||
1.一种阿维菌素高产菌种的选育方法,包括如下步骤:
(1)将待筛选阿维菌素菌株制备成菌悬液;
(2)将步骤(1)所述菌悬液诱变处理得诱变菌悬液;
(3)将步骤(2)诱变菌悬液经液滴微流控技术分散成小液滴培养液;
(4)将步骤(3)小液滴培养液经红外检测筛选得候选小液滴培养液;
(5)将步骤(4)候选小液滴培养液经涂布与培养,斜面培养,接种子瓶培养基,转发酵瓶培养基,最后液相色谱法检测验证菌种的生产能力,高产菌株复筛留种,高产性能考察,最终留种。
2.按照权利要求1所述的阿维菌素高产菌株选育方法,其特征在于步骤(1)所述待筛选菌种为已经过活化的斜面菌种。
3.按照权利要求1所述的阿维菌素高产菌株选育方法,其特征在于步骤(2)所述诱变为物理诱变或化学诱变。
4.按照权利要求3所述的阿维菌素高产菌株选育方法,其特征在于所述物理诱变为紫外诱变。
5.按照权利要求3所述的阿维菌素高产菌株选育方法,其特征在于所述紫外诱变时间为30~40s。
6.按照权利要求1所述的阿维菌素高产菌株选育方法,其特征在于步骤(3)所述液滴微流控技术,以油为连续相,菌悬液为分散相,将诱变菌悬液分散成小液滴培养液。
7.按照权利要求1所述的阿维菌素高产菌株选育方法,其特征在于步骤(4)所述红外检测筛选仪器为MoFlo Astrios EQ超高速流式分选系统。
8.按照权利要求1所述的阿维菌素高产菌株选育方法,其特征在于步骤(4)红外检测筛吸收波长为488nm。
9.按照权利要求1所述的阿维菌素高产菌株选育方法,其特征在于步骤(5)所述斜面培养时间7-9天。
10.按照权利要求1所述的阿维菌素高产菌株选育方法,其特征在于步骤(5)所述斜面培养条件为温度28±0.5℃,湿度35±5%。
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