[发明专利]用于检测新冠病毒的配对抗体及其应用

说明书

本发明涉及一种用于检测新冠病毒的配对抗体及其应用，其包括第一检测抗体和第二检测抗体；第一检测抗体具有如SEQ ID NO:1~3所示的轻链互补决定区，以及如SEQ ID NO:4~6所示的重链互补决定区，第二检测抗体具有如SEQ ID NO:7~9所示的轻链互补决定区，以及如SEQ ID NO:10~12所示的重链互补决定区。本发明筛选得到具有上述互补决定区序列的配对抗体，其识别N蛋白的不同表位，且由于两种抗体识别的是N蛋白非核酸结合区域，不会受核酸负电荷干扰，对核酸抗原表现出了兼容性，具有较好的稳定性，同时上述配对抗体具有较高的亲和力，病毒N蛋白检测灵敏度高。

技术领域

本发明涉及免疫检测技术领域，特别是涉及一种用于检测新冠病毒的配对抗体及其应用。

背景技术

2019新型冠状病毒（2019-nCoV），2020年1月12日被世界卫生组织命名为“2019-nCoV”，2020年2月11日被国际病毒分类委员会命名为“严重急性呼吸综合征冠状病毒2（SARS-CoV-2）”。SARS-CoV-2为圆形或椭圆形的β属新型冠状病毒，呼吸道飞沫传播和接触传播是其主要传播途径。人群普遍易感，潜伏期一般3~7天，潜伏期内存在传染性。SARS-CoV-2 目前检测方法包括肺部影像、RT-PCR、血液抗体检测方法。RT-PCR是病毒诊断的金标准方法，操作过程麻烦，需要专业设备及仪器。血液总抗体或IgG\IgM，检测简单快速，但抗体在体内存在较长一段时间，无法区分现症感染与既往感染。此外部分人群感染发病早期（1~7天），免疫系统产生IgM/IgG抗体滴度较低，导致漏检情况。病毒抗原可以在感染无症状阶段及发病早期检出，及时反映感染状态，区分既往感染与现症感染，取样操作相对简单，是实现人群中新冠病毒快速筛查的重要手段，对于抗击新冠病毒传播具有重要价值。

SARS-CoV-2 N蛋白（nucleocapsid protein）是一种重要的结构蛋白，N蛋白为有419个氨基酸的碱性磷酸蛋白，分子量45.6kD，等电点pI 10.1，由N 端结构域（NTD）和C 端结构域（CTD）以及连接两个结构域及其两侧的三段无规则柔性区（IDR）构成，均富含精氨酸和赖氨酸残基，NTD结构域与病毒RNA结合，CTD结构域参与N蛋白二聚体结构形成。N蛋白是病毒含量最丰富的结构蛋白，在感染细胞中大量表达，其免疫原性强，是早期病毒抗原检测靶标。

但是N蛋白结合核酸，导致抗原表位屏蔽，且核酸PO₃^2-负电荷也降低抗体与N蛋白亲和力，一般的抗体组合容易受到核酸的影响，稳定性较差。同时，临床新冠病毒初筛需要接近RT-PCR病毒检测灵敏度，N抗原检测限50pg/mL甚至更低，目前缺乏满足此临床需求的抗体组合。

发明内容

基于此，有必要提供一种稳定性和灵敏度较好的用于检测新冠病毒的配对抗体。

一种用于检测新冠病毒的配对抗体，包括第一检测抗体和第二检测抗体；所述第一检测抗体具有如SEQ ID NO:1所示的轻链互补决定区CDR1、如SEQ ID NO:2所示的轻链互补决定区CDR2和如SEQ ID NO:3所示的轻链互补决定区CDR3，以及如SEQ ID NO:4所示的重链互补决定区CDR1、如SEQ ID NO:5所示的重链互补决定区CDR2和如SEQ ID NO:6所示的重链互补决定区CDR3；所述第二检测抗体具有如SEQ ID NO:7所示的轻链互补决定区CDR1、如SEQ ID NO:8所示的轻链互补决定区CDR2和如SEQ ID NO:9所示的轻链互补决定区CDR3，以及如SEQ ID NO:10所示的重链互补决定区CDR1、如SEQ ID NO:11所示的重链互补决定区CDR2和如SEQ ID NO:12所示的重链互补决定区CDR3。