[发明专利]检测配方食品中目标母乳低聚糖的方法

权利要求书

1.一种检测配方食品中目标母乳低聚糖的方法，所述配方食品为配方奶粉，其包括如下步骤：

(1)提供待检测配方奶粉的样品水溶液，该配方奶粉包含母乳低聚糖，并且任选地包含脂肪和/或蛋白质；

(2)分离样品水溶液以除去脂肪和蛋白质，以形成经分离处理的水溶液；

(3)将得自步骤(2)的水溶液中母乳低聚糖的还原端异头基使用过量还原剂还原成二醇结构，其中还原剂为硼氢化钠或硼氢化钾；

(4)采用液相色谱对得自步骤(3)的水溶液进行梯度洗脱并且采用与液相色谱串联的质谱检测所洗脱的物质；

(5)将所洗脱的物质的色谱峰的保留时间以及质谱信号与待检测的目标母乳低聚糖标准物各自在与步骤(4)相同条件下获得的标准色谱峰的保留时间以及标准质谱的信号进行比较，

-(5-1)以确定样品中是否存在待检测的目标母乳低聚糖，或

-(5-2)以确定样品中是否存在待检测的目标母乳低聚糖并且确定样品中所存在的目标母乳低聚糖各自的色谱峰面积，然后根据外标法得到样品水溶液中各目标母乳低聚糖的浓度，然后根据该浓度计算试样中各目标母乳低聚糖的含量，

其中所述目标母乳低聚糖为如下7种母乳低聚糖：2’-岩藻糖基乳糖、3-岩藻糖基乳糖、3’-唾液酸基乳糖、6’-唾液酸基乳糖、乳糖-双岩藻糖基四糖、乳糖-N-新四糖和乳糖-N-四糖，

其中该液相色谱使用多孔石墨化碳色谱柱进行，

该梯度洗脱条件如下：

其中：

流动相A通过如下制备：吸取1mL乙酸，称取0.39g乙酸铵，加入到1000mL容量瓶中，加水定容至刻度，混匀；

流动相B通过如下制备：吸取1mL乙酸，称取0.39g乙酸铵，加入到1000mL容量瓶中，加入50mL水，乙酸铵溶解后，用乙腈定容至刻度，摇匀。

2.如权利要求1中所述的方法，其中所述配方奶粉为婴儿配方奶粉、幼儿配方奶粉、或特殊医学用途配方食品。

3.如权利要求2中所述的方法，其中所述配方奶粉为婴儿配方奶粉。

4.如权利要求2中所述的方法，其中所述配方奶粉为幼儿配方奶粉。

5.如权利要求1中所述的方法，其中所述待检测配方奶粉为固体形式，并且提供待检测配方奶粉的样品水溶液包括：提供固体形式的待检测配方奶粉；将该待检测配方奶粉溶解于水中以形成待检测配方奶粉的样品水溶液，或者将该待检测配方奶粉粉碎，将该经粉碎的待检测配方奶粉溶解于水中以形成待检测配方奶粉的样品水溶液。

6.如权利要求1-5任一项中所述的方法，其中该配方奶粉包含2’-岩藻糖基乳糖、3-岩藻糖基乳糖、3’-唾液酸基乳糖、6’-唾液酸基乳糖、乳糖-双岩藻糖基四糖、乳糖-N-新四糖和乳糖-N-四糖中的1种、2种、3种、4种、5种、6种或7种。

7.如权利要求1-5任一项中所述的方法，其中分离样品水溶液以除去脂肪和蛋白质的步骤(2)包括：分离样品水溶液中的脂肪的步骤，和分离样品水溶液中的蛋白质的步骤。

8.如权利要求7中所述的方法，其中分离样品水溶液中的脂肪的步骤通过离心进行。

9.如权利要求8中所述的方法，其中离心进行一次或多次。

10.如权利要求7中所述的方法，其中分离样品水溶液中的蛋白质的步骤通过超滤进行。

11.如权利要求10中所述的方法，其中超滤通过使用超滤管在离心机中进行。

12.如权利要求10所述的方法，其中超滤进行一次或多次。

13.如权利要求8所述的方法，其中离心过程在1-30℃的温度下进行。