[发明专利]分离、测定花椒提取物及其制品中山椒素含量方法及应用

说明书

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种分离、测定花椒提取物及其制品中山椒素含量方法及应用，所述方法包括：将花椒提取物及其制品用甲醇制成配制溶液和稀释溶液，分别使用液相色谱法进行梯度洗脱，其中，流动相为有机溶剂与磷酸水溶液的混合溶液；梯度洗脱分离后，进入检测器进行检测，使用外标法计算各山椒素的含量。本发明提供的分离及测定花椒提取物及其制品中山椒素含量方法柱压低，基线平稳，各山椒素分离效果良好，且在41分钟内可完成分离，而且能够检测到花椒提取物及其制品中六种山椒麻素的含量，实际操作性强，检测数据准确可靠，用于评价花椒提取物及其制品中山椒素含量更科学、更准确。

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种分离、测定花椒提取物及其制品中山椒素含量方法及应用。

背景技术

花椒为中国特有香料，位列十三香之首，作为一种食用香料，具有香料与药用双重价值，能去寒、养胃、调节食品口味的功效，因而深受人们的喜爱。花椒产品的重要核心技术指标就是花椒麻度，但是，现对花椒麻度的称谓表述各异，难以比较并判断花椒及其深加工产品的麻度品质。

目前，国标GB/T30391-2013花椒，无麻度检测方法；国标GB/T38495-2020感官分析花椒麻度评价-斯科维尔指数法，是采用斯科维尔指数法对花椒麻度进行感官评价的方法；中国医药保健品进出口商会团体标准TCCCMHPIE1.31-2018植物提取物-花椒提取物，其特点是对花椒麻素的一种主要成分(如羟基-a-山椒素)进行定量测定，以此代表全部麻味物质，从而推导出花椒麻素含量；中国供销合作社行标GH/T1290-2020花椒及花椒加工产品-花椒酰胺总含量的测定采用紫外分光光度法；中国供销合作社行标GH/T 1142-2017花椒，无麻度检测方法；重庆市地方标准《花椒麻味物质的检测方法高效液相色谱法》DB50/T321-2009，无市售标准物质或参照物，且实验室自制标准品技术困难不易获得，加上无柱温色谱参数，故此方法不具备重现性；四川省地方标准DBS51/008-2019食品安全地方标准-花椒油，采用紫外分光光度法的麻度检验方法，且样品检测范围也不同；中国食品土畜进出口商会团体标准T/CFNA6101-2020花椒，针对花椒原料，采用分光光度法检测得到花椒麻素含量；重庆市地方标准《地理标志产品江津花椒》DB50/T中的高效液相色谱法，其特点是针对花椒原料中5种山椒素的定性定量测定得到花椒麻素含量，其液相色谱条件下5种山椒素的分离效果较好，但流动相甲醇水的柱压偏高，甲醇空白溶液的图谱基线在30分钟后的基线波动较大，故此方法在应用上的普遍适用性欠佳。

总的来说，现有技术公开的花椒麻素的检测方法主要有紫外分光光度法和高效液相色谱法两种，紫外分光光度法检测设备成本较低，方法简易，但检测数据不够准确，适用于企业内部生产环节的质量控制，而高效液相色谱法能够对花椒麻素的多个特征组分展开定性定量测定，检测数据更准确可靠，但是现有的高效液相色谱法不能对花椒麻素的几种主要成分开展定量分析，而是检测其中一种成分(如羟基-a-山椒素)代表全部麻味物质，从而推导出花椒麻素含量，如中国医药保健品进出口商会团体标准《植物提取物花椒提取物》T/CCCMHPIE 1.31-2018、中国供销合作社行业标准《花椒及花椒加工产品花椒酰胺总含量的测定高效液相色谱法》GH/T 1291-2020、重庆市地标《花椒麻味物质的检测方法高效液相色谱法》DB50/T321-2009，这种分析结果是不准确的，不够严谨，不利于对花椒提取物中每一种麻味物质含量的了解，因此，制定一种快速、准确、高效的检测花椒加工产品麻度的方法势在必行。

发明内容

有鉴于此，本发明目的在于提供一种分离及测定花椒提取物或花椒提取物制品中山椒素的含量的方法，该方法可以有效分离出花椒提取物或花椒提取物制品中六种山椒素(羟基-α-山椒素、羟基-β-山椒素、羟基-γ-山椒素、羟基-ε-山椒素、羟基-γ-异山椒素、γ-山椒素其中的一种或多种)，并进行检测，根据检测峰值使用外标法测定六种山椒素的含量，该方法高效精确，在41分钟内即可完成分离。